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目的:建立角膜水肿、角膜内皮功能失代偿的动物模型;探讨地塞米松联合高渗液对兔眼角膜内皮的保护作用。
方法:健康成年日本大耳白兔20只(40眼),体重2-2.2Kg,雌雄各半,排除有眼部疾患的实验兔。按随机数字表法分为A、B、C、D四组,每组各5只10眼。表面麻醉下用A超测量各组兔眼角膜中央厚度(CCT),角膜内皮仪测量角膜内皮计数,前节OCT检查角膜全层的状态。各组实验兔均在全身麻醉后,固定于动物实验手术台上,显微有齿镊固定眼球,开睑器开睑,2.4mm角膜穿刺刀分别于角膜12点钟位、3点钟位透明角膜缘做自闭性切口,给予低渗液(平衡盐溶液与灭菌注射用水按3∶7配比,5ml/min流速)维持前房灌注10分钟,并在手术显微镜下观察角膜水肿情况。各组术后处理:A组术后立即予以地塞米松注射液0.2ml结膜下注射、高渗葡萄糖液频繁点眼;B组术后立即予以0.9%生理盐水0.2ml结膜下注射、平衡盐溶液频繁点眼;C组术后第二天予以地塞米松注射液0.2ml结膜下注射、高渗葡萄糖液频繁点眼;D组术后第二天予以0.9%生理盐水0.2ml结膜下注射,平衡盐溶液频繁点眼。各组滴眼液滴眼每天8小时,共计7天。术后第1、3、5、7天在裂隙灯下观察兔眼角膜水肿情况,行角膜内皮计数,角膜前节OCT检查,角膜厚度测量。
结果:A组在整个实验观察期间角膜无水肿或仅轻度水肿,角膜厚度几乎没有增加,与术前相比差异无统计学意义(P>0.05),B、C、D组术后角膜均出现不同程度水肿,角膜厚度增加,与术前及A组比较差异有统计学意义(P<0.05);C组与B、D组相比,角膜水肿程度轻,恢复时间更短,角膜厚度测量结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。前节OCT图像的数据分析显示:A组兔眼角膜无明显增厚,与术前相比差异不明显;C组兔眼角膜基质层水肿,轻度增厚;B、D两组兔眼角膜基质明显水肿,厚度增加,超过前节OCT自动测厚上限(800μm)。角膜内皮测量结果显示术后第1、3、5、7天,A组角膜内皮细胞数量变化不大,差异无统计学意义(F=0.02,P>0.05);C组术后第7天可测出角膜内皮,与术前及A组术7天后相比差异有统计学意义(F=7.9,P<0.05);由于角膜水肿B、D两组在观察期间不能测出角膜内皮数量。
结论:采用低渗液维持前房灌注,可以制备角膜水肿、角膜失代偿的动物模型,用于基础及临床研究。地塞米松结膜下注射联合高渗液点眼对兔眼角膜内皮细胞有良好的保护作用,术后早期(0-3h)应用能更有效的预防及治疗兔眼角膜水肿,甚至可避免角膜内皮细胞功能失代偿的发生。
方法:健康成年日本大耳白兔20只(40眼),体重2-2.2Kg,雌雄各半,排除有眼部疾患的实验兔。按随机数字表法分为A、B、C、D四组,每组各5只10眼。表面麻醉下用A超测量各组兔眼角膜中央厚度(CCT),角膜内皮仪测量角膜内皮计数,前节OCT检查角膜全层的状态。各组实验兔均在全身麻醉后,固定于动物实验手术台上,显微有齿镊固定眼球,开睑器开睑,2.4mm角膜穿刺刀分别于角膜12点钟位、3点钟位透明角膜缘做自闭性切口,给予低渗液(平衡盐溶液与灭菌注射用水按3∶7配比,5ml/min流速)维持前房灌注10分钟,并在手术显微镜下观察角膜水肿情况。各组术后处理:A组术后立即予以地塞米松注射液0.2ml结膜下注射、高渗葡萄糖液频繁点眼;B组术后立即予以0.9%生理盐水0.2ml结膜下注射、平衡盐溶液频繁点眼;C组术后第二天予以地塞米松注射液0.2ml结膜下注射、高渗葡萄糖液频繁点眼;D组术后第二天予以0.9%生理盐水0.2ml结膜下注射,平衡盐溶液频繁点眼。各组滴眼液滴眼每天8小时,共计7天。术后第1、3、5、7天在裂隙灯下观察兔眼角膜水肿情况,行角膜内皮计数,角膜前节OCT检查,角膜厚度测量。
结果:A组在整个实验观察期间角膜无水肿或仅轻度水肿,角膜厚度几乎没有增加,与术前相比差异无统计学意义(P>0.05),B、C、D组术后角膜均出现不同程度水肿,角膜厚度增加,与术前及A组比较差异有统计学意义(P<0.05);C组与B、D组相比,角膜水肿程度轻,恢复时间更短,角膜厚度测量结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。前节OCT图像的数据分析显示:A组兔眼角膜无明显增厚,与术前相比差异不明显;C组兔眼角膜基质层水肿,轻度增厚;B、D两组兔眼角膜基质明显水肿,厚度增加,超过前节OCT自动测厚上限(800μm)。角膜内皮测量结果显示术后第1、3、5、7天,A组角膜内皮细胞数量变化不大,差异无统计学意义(F=0.02,P>0.05);C组术后第7天可测出角膜内皮,与术前及A组术7天后相比差异有统计学意义(F=7.9,P<0.05);由于角膜水肿B、D两组在观察期间不能测出角膜内皮数量。
结论:采用低渗液维持前房灌注,可以制备角膜水肿、角膜失代偿的动物模型,用于基础及临床研究。地塞米松结膜下注射联合高渗液点眼对兔眼角膜内皮细胞有良好的保护作用,术后早期(0-3h)应用能更有效的预防及治疗兔眼角膜水肿,甚至可避免角膜内皮细胞功能失代偿的发生。