胃转流术对2型糖尿病大鼠肝脏和胰腺Fox01表达影响的研究

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目的近十年来,2型糖尿病患者数量迅速增长,严重危害人类健康。胃肠手术之一-胃转流术能治疗糖尿病成为人们关注的焦点,鉴于Fox01因子在糖尿病和肥胖的发病中占重要作用。我们研究胃转流术对2型糖尿病大鼠肝脏和胰腺中Fox01因子表达的影响,初步探讨胃转流术改善2型糖尿病的机理。方法12周龄的Sprague-Dawley大鼠经高脂饲料喂养4周后按每只30mg/kg链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)腹腔注射,筛选糖尿病造模成功者30只,并随机分为糖尿病手术组行胃转流术(A组,10只)、假手术组行假手术(B组,10只)、糖尿病对照组(D组,10只),其中未注射STZ的大鼠作为正常对照组(C组,10只)。C、D组按A、B组术前和术后的4、8、16、24周检测空腹血糖、血清胰岛素(Insulin)和胰高血糖素样肽(GLP-1)的含量。24周后处死各组大鼠,免疫组化和Western blot(蛋白印迹法)检测各组肝脏、胰岛中Fox01的表达情况。结果A组大鼠术后血糖呈现逐渐下降趋势:术后4周的空腹血糖由术前(20.2±2.1)mmol/L降至(10.5±2.5)mmol/L;术后8周(10.2±2.1)mmol/L;术后16周为(8.2±1.3)mmol/L;术后24周空腹血糖为(7.7±1.1)mmol/L,但其平均值仍高于C组(p<0.05)。B组大鼠假手术术后4周空腹血糖由术前的(19.2±2.0)mmol/L转变为(18.3±6.1)mmol/L,术后8周为(22.5±3.2)mmol/L,术后16周为(21.9±2.7)mmol/L,术后6月则升至(22.9±2.8)mmol/L。C组大鼠仅经过了高脂肪饲料喂养1月,并未行手术,按上述不同时间点空腹血糖分别为:(3.6±0.4)mmol/L;(3.6±0.3) mmol/L;(3.6±0.3) mmol/L;(3.4±0.3) mmol/L;(3.5±0.5)mmol/L,整个研究过程中该组大鼠血糖一至处于正常范围。D组大鼠系造模成功而未行手术处理的大鼠,随时间递进其血糖有缓慢升高的现象,按上述不同时间点空腹血糖分别为:(20.0±2.1)mmol/L;(21.4±2.6)mmol/L;(22.4±3.0)mmol/L;(24.1±3.7)mmol/L;(25.6±3.4)mmol/L.A组大鼠术前、术后4周、8周、16周和24周的空腹胰岛素(Insulin)分别为:(2.87±0.08)mU/L、(2.91±0.08)mU/L、(2.88±0.08)mU/L、(2.95±0.08)mU/L和(3.00±0.06)mU/L,呈缓慢升高趋势。其相应时间点的空腹血清GLP-1测量结果为:(8.7±0.9)pmol/L、(13.2±1.0)pmol/L、(16.1±0.2)pmol/L、(18.4±0.7)pmol/L和(23.5±0.2)pmol/L,术后4周起,与B和D组同期相比,GLP-1明显升高(p<0.05)。B组大鼠血清胰岛素则分别为(2.86±0.11)mU/L、(2.88±0.13)mU/L、(2.89±0.14)mU/L、(2.89±0.14)mU/L、(2.88±0.13)mU/L。相应时间点的GLP-1则分别为:(7.4±0.2)pmol/L、(6.8±0.6)pmol/L、(7.0±0.1)pmol/L、(7.9±0.4)pmol/L和(5.7±1.2)pmol/L。C组大鼠相应时间点胰岛素测定结果分别为:(3.71±0.07)mU/L、(3.68±0.11)mU/L、(3.70±0.08)mU/L、(3.63±0.11)mU/L和(3.68±0.14)mU/L;相应时间点的GLP-1分别为:(17.9±0.1)pmol/L、(19.7±0.3)pmol/L、(21.4±1.2) pmol/L、(18.1±0.4)pmol/L和(19.9±1.0)pmol/L。D组大鼠血清胰岛素则分别为(2.76±0.09)mU/L、(2.74±0.10)mU/L、(2.70±0.10)mU/L、(2.69±0.12)mU/L、(2.70±0.11)mU/L。相应时间点的GLP-1则分别为:(7.7±0.5)pmol/L、(6.1±1.0)pmol/L、(4.4±0.2)pmol/L、(5.2±0.8)pmol/L和(4.9±0.7)pmol/L。A组大鼠术后24周肝脏Fox01的表达相对量为0.92±0.02,B组大鼠为1.865±0.18,C组和D组分别为0.46±0.01和1.79±0.15,A组大鼠肝脏Fox01的表达量明显低于B、D组,差异有统计学意义(p<0.05)各组大鼠胰腺组织中的胰岛团中,Fox01蛋白的表达是不完全相同的,A组大鼠胰腺Fox01的表达主要以胞浆表达为主,B组大鼠胰腺Fox01的表达主要以β细胞胞核为主呈强阳性,胞浆表达呈阳性,B组与D组的基本相同,C组胰腺Fox01的表达呈弱阳性,主要分布于胞浆。结论1、高脂肪饲料结合STZ注射方法诱导的2型糖尿病大鼠可作为研究胃转流术治疗糖尿病的动物模型。2、胃转流术对人工诱导的2型糖尿病大鼠有确切的治疗作用,能一定程度上发挥降糖作用。3、术后血清GLP-1的升高以及肝脏、胰腺中Fox01因子表达的变化可能是手术治疗糖尿病的机制之一。
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