慢病毒介导的RNAi沉默VCAM-1基因对人舌鳞癌裸鼠移植瘤的影响

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目的:探讨慢病毒介导的血管细胞粘附分子-1 (vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1)基因沉默对鳞状细胞癌移植瘤生长的抑制作用。方法:将人舌鳞癌细胞Tca-8113接种至BALB/c裸鼠右侧背部皮下,复制鳞状细胞癌裸鼠移植瘤模型。1周后移植瘤直径约2.5mm,将18只裸鼠按移植瘤体积的大小随机分成三组:干扰组、阴性对照组、空白对照组。分组后对三组裸鼠给予不同干预处理:干扰组:瘤内注射VCAM-1-shRNA的慢病毒颗粒(5×106TU,0.1mL);阴性对照组:瘤内注射携带无关序列的慢病毒颗粒(5×106TU,0.1mL);空白对照组:瘤内注射生理盐水(0.1mL)。每3天注射1次,共计7次。观察裸鼠的一般情况及移植瘤生长情况,测量肿瘤近似体积并绘制移植瘤的生长曲线。4周后处死裸鼠,解剖分离瘤体组织,称量各组瘤体质量并计算干扰组的抑瘤率。HE染色观察各组移植瘤的形态学特征;免疫组织化学检测各组瘤体组织中VCAM-1蛋白的表达及CD31标记的肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)的情况;应用图像分析系统测量各组VCAM-1蛋白表达的平均光密度(optical density, OD)值,并分析VCAM-1的表达量与MVD值的相关性。结果:1、三组裸鼠移植瘤组织经病理检查证实为鳞状细胞癌。2、干扰组移植瘤的生长速度减缓,体积较小,质量明显低于两个对照组,差异有统计学意义,P<0.05,抑瘤率为36.21%。3、干扰组的OD值和MVD值均低于阴性对照组、空白对照组,而且差异有统计学意义,P均<0.05。4、瘤体组织中VCAM-1蛋白表达的OD值与MVD值呈正相关性(r=0.834,P<0.05)。结论:慢病毒介导的VCAM-1基因沉默能够能抑制人舌鳞癌裸鼠移植瘤生长.VCAM-1蛋白的表达及血管的生成,提示VCAM-1有望成为口腔鳞状细胞癌基因治疗的新靶点。
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