十种植物提取物对茶树叶部病原菌生物活性的研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kingwangcheng
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天然植物富含许多种类的生物活性物质,在植物活性化合物中寻找植物源农药或农药先导化合物,是目前防治各种植物病害和开发新型植物源农药的方向之一。我国具有众多的植物资源,这些植物资源在治疗人类疾病和防治植物虫草害方面的研究比较广泛,但其在防治植物真菌、细菌和病毒病害方面的研究较少。本论文对恩施地区茶树病害进行了调查,分离得到了12种茶树病原菌,选取茶刺盘孢属、茶拟茎点霉属、茶茎点霉属、茶链格孢属、茶拟盘多毛孢属等病原菌作为本文的供试菌;选取了藤茶、香樟、银杏、枇杷、松针、金银花、鱼腥草、艾草、夹竹桃和柠檬桉等10种供试植物,通过热水浸提、水超声提取、乙醇超声提取、乙醇索氏提取、石油醚超声提取、石油醚索氏提取等6种方式对供试植物内活性成分进行了提取分离;将各种植物提取物做了室内抑菌活性筛选实验,根据实验结果,进一步做了8种有效植物提取物的室内毒力测定,测得了8种植物提取物对拟茎点霉属菌的EC50值;为进一步研究植物提取活性物质的时效性,是否能用于实际应用,选择了8种抑菌效果良好的植物提取物对制备后立即实验和制备后存放15 d两种时间下对拟茎点霉属的抑菌效果。根据上述实验结果,进一步分离纯化了抑菌效果和稳定性良好的柠檬桉乙醇超声提取物,并对其化学组分进行结构鉴定;测定了柠檬桉乙醇超声提取物中两种主要有效成分单体的抑菌效果。藤茶、香樟、银杏、枇杷、松针、金银花、鱼腥草、艾草、夹竹桃和柠檬桉等10种植物通过6种提取方式得到的提取物在室内抑菌试验中结果显示:10种植物的抑菌活性活性如下:超声提取物>索氏提取物>热水提取物,并且乙醇>石油醚>水;柠檬桉、夹竹桃和银杏等植物抑菌活性相对较好。以拟茎点霉属为例,在20 mg/mL浓度下,10种植物乙醇超声提取物的抑菌活性结果为柠檬桉>松针>夹竹桃>香樟>银杏>藤茶>艾草>金银花>鱼腥草。柠檬桉乙醇超声提取物对刺盘孢属抑菌程度达到了97.9%,对茎点霉属、链格孢属和拟茎点霉属病原菌的抑制效果也达到了97.5%、92.5%和95.1%,选取的柠檬桉乙醇索氏提取物A、夹竹桃乙醇超声提取物B、松针乙醇超声提取物C、香樟石油醚超声提取物D、艾叶乙醇超声提取物E、金银花乙醇超声提取物F、柠檬桉乙醇超声提取物G、银杏乙醇超声提取物H等8种植物粗提物抑菌活性与浓度试验结果表明,除F外,A-H的EC50值由大至小为A>D>B>C>E>G>H,G的EC50值低至0.8 mg/mL。通过对A-H保存15 d后的抑菌效果及时做的结果对比发现,G的抑菌活性相对稳定,其他提取物的抑菌活性都有不同程度的下降,其中A、B和D的抑菌活性有明显的下降。根据以上浓度筛选实验和时效性实验结果,选取了具有良好抑菌活性和稳定性的柠檬桉乙醇超声提取物G为研究对象,通过GC-MS对其成分进行了分离鉴定,结果显示,G中活性成分主要有香茅醛、香茅醇、β-榄香烯、β-石竹烯和α-石竹烯;G两种主要成分香茅醛和香茅醇都表现出较好的抑菌活性,并且香茅醛比香茅醇有着更好的抑菌活性。香茅醛和香茅醇对茶茎点霉属病原菌在高浓度时具有杀菌作用,在低浓度时表现出一定的抑菌活性,其中香茅醇的EC50值为0.275 mg/L,香茅醛的EC50值为0.103 mg/L。
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