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转移相关基因1(metastasis-associated gene 1, MTA1)是一个与肿瘤转移相关、具有组蛋白脱乙酰基活性的基因,通过改变组蛋白的乙酰化状态进而调控基因表达。本研究探讨了MTA1基因的改变对宫颈癌恶性表型的影响。(1)免疫组化研究我们用免疫组化法检测了正常宫颈、宫颈癌以及转移淋巴结组织中MTA1蛋白的表达水平。结果显示,与正常宫颈上皮相比,宫颈癌与淋巴结转移癌组织中MTA1阳性细胞数量及染色强度均明显增高。宫颈癌中MTA1蛋白的过表达发生率为64%,高于淋巴结转移灶(47.62%)。正常宫颈中MTA1蛋白定位于细胞核；宫颈癌组织中MTA1则出现了细胞核／细胞浆／细胞膜的多种形式的蛋白定位,表明在肿瘤发生过程中存在MTA1表达和定位的紊乱。宫颈癌中MTA1蛋白的过表达与淋巴转移、浸润深度及脉管浸润有关,与组织学类型、分化程度无关。相关性分析显示MTA1蛋白与抑癌基因PTEN蛋白的表达呈负相关。Kaplan-Meier生存分析未提示MTA1是宫颈癌的不良预后因素,需要扩大样本进一步研究。(2)细胞效应学实验1)宫颈癌细胞系中,免疫荧光显示Hela细胞中MTA1蛋白主要定位于细胞核,而CaSki细胞的胞核和胞浆均呈阳性表达。RT-PCR及Western blot显示CaSki细胞中MTA1mRNA及蛋白表达高于Hela细胞。2)瞬时转染MTA1-SiRNA入CaSki细胞,可见细胞生长减慢,克隆形成及划痕愈合能力下降,但对细胞周期的改变不明显。随着干扰浓度的增加、时间的延长,siRNA对MTA1 mRNA表达的抑制作用逐渐增强。3)RT-PCR. Western blotting、MTT、transwell及细胞粘附等方法显示稳定转染MTA1表达质粒能促进CaSki细胞的生长、克隆形成及划痕愈合能力,促进细胞的体外粘附、侵袭细胞外基质及体外迁移能力；RNA干扰质粒沉默MTA1基因表达则具有相反作用,但对细胞周期的改变不明显。RT-PCR结果显示MTA1基因表达水平的改变,能导致多个转移相关基因表达的改变,包括粘附分子、癌基因及抑癌基因等。(3)动物实验在建立的CaSki细胞裸鼠皮下成瘤模型中,转染MTA1基因表达质粒的细胞体内成瘤能力增强,而转染MTA1基因干扰质粒的细胞体内成瘤能力显著下降,差异具有统计学意义。本研究得出以下结论：宫颈癌组织中MTA1蛋白的表达明显升高,与抑癌基因PTEN的表达呈负相关,与肿瘤的恶性生物学行为关系密切,其表达异常可能参与了宫颈癌的发生发展过程。MTA1蛋白的高表达能增强宫颈癌细胞的体外侵袭及迁移能力,RNA干扰沉默MTA1基因的表达能导致宫颈癌细胞转移能力及其它恶性行为的下降。本实验为进一步研究MTA1基因的作用机制以及应用RNA干扰技术进行MTA1为靶点的治疗研究打下了一定的基础。