论文部分内容阅读
目的吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)在很多肿瘤微环境中,为肿瘤逃避免疫监督起到了重要的作用,但起作用的具体机制尚在研究之中。本文用IDO以及色氨酸经IDO催化后分解生成的代谢产物(L-犬尿素、邻氨基苯甲酸、喹啉酸)作用于肝癌细胞,观察肝癌细胞的生长及凋亡的情况。方法在HepG2细胞培养中加入IDO,用MTT法测定HepG2细胞的活力,另用IDO的抑制剂1-甲基色氨酸(1-MT)进行干预,观察IDO对HepG2细胞活力的影响作用能否被抑制。观察色氨酸各个代谢产物对肝癌细胞生长的影响,用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率以及细胞坏死率的变化。结果不同浓度的IDO作用于HepG2细胞具有明显的时间和剂量依赖性,IDO浓度在0.5 mmol/L和5 mmol/L时可以促进HepG2细胞的生长(P<0.05),最佳作用时间24小时,光密度值分别为1.28±0.04、1.31±0.02,显著高于对照组0.73±0.03;加入1-MT后IDO的这一作用受到抑制。代谢产物中邻氨基苯甲酸与L-犬尿素对HepG2细胞有促进生长的作用,并具有明显的时间剂量依赖性;与对照组相比,两物质在0.1mmol/L浓度水平上作用24h的生长抑制率分别为(-32.94±1.05)%和(-65.15±0.46)%,1mmol/L时作用24h的生长抑制率分别为(-50.58±1.12)%和(-78.62±0.92)%。经流式细胞仪检测,两种物质均可以改变HepG2细胞周期分布(减少G0- G1期细胞百分比,增加S期比例)。只有喹啉酸在1mmol/L时能发挥提高细胞坏死率和凋亡率,抑制肝癌细胞生长的作用(P<0.05),其最佳作用时间为24h,此时的细胞坏死率为(23.43±2.16)%,凋亡率为(9.01±0.24)%。结论IDO表现为促进肝癌细胞生长的作用,1-MT可以抑制这一作用。L-犬尿素、邻氨基苯甲酸能够通过改变HepG2细胞周期的分布增加S期细胞的比例,促进HepG2细胞的增殖。喹啉酸在较大浓度时才能对HepG2细胞有抑制生长作用,其作用机制以提高细胞坏死率为主。