脂质转运蛋白是植物中大量存在的一类富含半胱氨酸的小分子碱性脂质结合蛋白,能够在体外结合多种疏水分子,据报道,LTPs可以跨膜转运多种脂类物质,并且能够参与生物和非生物胁迫响应。我们以TI1068烟草作为转化品系,利用生物信息学相关软件对该基因进行一个详细的基本特征分析,通过农杆菌转化技术将NtLTP1转入到TI1068烟草品系中,随后我们对该基因的功能进行探索。结果如下:1.对转基因烟草植株进行PCR检测、qRT-PCR检测发现:转基因烟草植株中NtLTP1基因的表达量得到了不同程度的提高,提高了约1.44~2.59倍。通过生物信息学相关软件分析发现NtLTP1基因可以编码114个氨基酸,其蛋白分子量为11.7309KDa,理论等电点(pI)为9.02,并且该蛋白具有标志性的保守区域ECM以及4个α-螺旋(46.49%),存在信号肽,是一种疏水性碱性蛋白。2.对野生型烟草和转基因烟草种子进行高盐和干旱胁迫处理,结果表明,在高盐和脱水的环境下,随着浓度的增加,野生型烟草和转基因烟草的萌发率均有所降低,但是仍然是转基因烟草的萌发率高于野生型烟草,且转基因烟草植株的根长较野生型植株更高,说明在应对干旱和高盐环境时,转基因烟草对逆境具有更大的耐受力。3.通过对野生型和转基因植株离体叶片青枯病菌丝块抗性测定,实验表明:在相同时间、相同环境下,转基因植株离体叶片的菌斑面积更小,且发病所需时间较长;随后通过对超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)等酶活力测定发现,转基因植株的SOD和CAT酶活力明显提高,SOD酶活力增加了0.38~1.16倍,CAT酶活力增加了0.25~1.05倍,转基因植株对青枯病菌的抗性明显增强。4.在测定植株叶片渗透性时发现:转基因烟草叶片的渗透性较野生型降低,其中经甲苯胺蓝染色后转基因烟草的着色面积更小;转基因烟草植株失水率较野生型下降了8.09%~17.75%;转基因植株叶绿素溶出含量也降低了10.49%~20.98%。表明增加NtLTP1基因的表达量后,促进了脂质转运活性,增强脂质合成,使得叶片表面的角质层增厚,叶片表面结构变得更加致密,从而导致转基因植株叶片渗透性降低。5.对野生型烟草和转基因烟草植株进行叶面萜醇类物质含量的测定,结果表明,与野生型植株相比,转基因烟草浸提的萜醇类物质含量明显增多,增加了约0.91~1.45倍,浸提液颜色也比野生型更深。