泰山百华花楸果实主要醇提物分离鉴定及活性分析

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百华花楸(Sorbus pohuashanensis(Hante)Hedl.),落叶乔木,属蔷薇科花楸属植物。其分布广泛,野生资源丰富。果实美丽,适宜观赏。有报道证实百华花楸果实中黄酮含量居十一种寒地浆果之首。花楸属植物中含有多种生物活性成分,在抗氧化、抑菌、抗肿瘤等方面都有显著功效。但百华花楸果实却没被开发利用,造成资源的浪费。因此对百华花楸果实的研究及开发利用十分紧迫。本论文研究的主要目的是通过对百华花楸果实乙醇提取物中的主要活性成分进行提取纯化,分析其化学结构,从而进一步探究其利用价值,为其尽早开发利用奠定基础。本论文主要研究内容及实验结论如下:1.通过超声波辅助提取百华花楸果实中的黄酮类化合物及其它主要活性物质如有机酸类等。以乙醇浓度、料液比、超声温度、超声功率为单因素条件,设计四水平四因素正交实验,得到单因素实验最佳提取工艺为乙醇浓度80%、料液比1:5、超声温度50℃、超声功率320 W;正交实验最佳提取工艺为乙醇浓度70%、料液比1:6、超声温度50℃、超声功率320 W,此条件下的总黄酮得率为26.1mg·g-1。2.在尽可能保留黄酮种类的情况下,对百华花楸果实乙醇提取物进行纯化,通过静态吸附及静态解析实验,选取最佳纯化树脂为大孔树脂LSA-4;动态解析采用浓度10%-100%乙醇梯度洗脱,通过聚酰胺薄层检测,得到最佳乙醇洗脱浓度为50%。3.选取羟基自由基清除率以及DPPH自由基清除率的实验作为检测百华花楸果实乙醇提取物的抗氧化活性的方法,得出其具有良好的抗氧化活性,有一定的利用价值。4.通过粗提的四种百华花楸果实乙醇提取物进行TLC检测,发现其黄酮种类都有差异,同一植株不同年份同一时节的黄酮种类也有差异,从而得出百华花楸果实中黄酮种类是变化的,可能的原因为各株百华花楸基因型不同及受环境因素影响。因其中所含的黄酮种类不同,其药理价值也可能会有差异,对选育优良的百华花楸植株及提供适宜生长环境提供一定的参考。5.通过对纯化后的百华花楸果实乙醇提取物利用HPLC、制备型HPLC、MS、NMR等技术联用,从而鉴定出三种主要化学物质为:绿原酸(3-O-Caffeoylquinic acid)、新绿原酸(5-O-Caffeoylquinic acid)、野樱苷(prunasin)。实验证明百华花楸果实里含有丰富的绿原酸,新绿原酸,对于从百华花楸果实中提取、分离、制备这三种天然产物提供了理论指导。也对以后的百华花楸果实中绿原酸,新绿原酸的研究及利用提供了方法。
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