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目的:胃癌是常见的恶性肿瘤,与其他实体肿瘤相似,新生血管生成在胃癌发生、发展和转移过程中发挥重要作用。Delta-like ligand 4（DLL4）作为Notch信号途径中的一个重要配体,参与复杂的信号传导通路,通过相邻细胞之间通讯调控细胞发育。近年研究发现:DLL4在人类多种肿瘤血管组织中过表达,并与肿瘤分子生物学特性密切相关,但DLL4/Notch信号途径在肿瘤新生血管生成中的作用及机制尚缺乏了解。本课题以胃癌为例,初步探讨DLL4/Notch信号途径在胃癌新生血管生成中的作用及其机制,期望为胃癌抗血管生成提供新的靶点与理论依据。方法:（1）收集92例外科手术切除胃癌标本及距病灶约5cm的癌旁正常胃粘膜组织制作组织芯片,采用免疫组化技术检测DLL4的表达,分析其与胃癌临床病理参数的关系;（2）构建一个表达DLL4小干扰RNA的重组腺相关病毒载体,制备靶向性抑制DLL4表达的高滴度重组腺相关病毒（rAAV2-U6-DLL4-shRNA-EGFP）;（3）将rAAV2-U6-DLL4-shRNA-EGFP感染HUVECs细胞,半定量RT-PCR,Western blot分别检测HUVECs细胞DLL4-mRNA和DLL4蛋白的改变;流式细胞技术分析细胞周期分布,MTT比色法检测细胞的生长变化,采用Matrigel三维培养系统观测HUVECs体外血管形成能力的变化;（4）建立胃癌细胞的荷瘤裸鼠模型,将rAAV-DLL4-shRNA予以荷瘤组织局部注射,观察肿瘤生长情况;应用免疫组化法观察肿瘤微血管数量、肿瘤微血管形态及肿瘤组织中Ephrin B2、DLL4蛋白表达的改变。结果:（1）DLL4在胃癌组织中的表达明显高于癌旁正常胃粘膜（85.9%vs35.3%,P<0.01）。DLL4表达与胃癌的转移（r=0.612,P<0.01）和胃壁浸润深度（r=0.482,P<0.01）呈正相关。DLL4表达阳性组的MVD指数明显高于DLL4表达阴性组（70.5±16.2 vs 32.54±10.4）,DLL4表达与MVD呈正相关（r=0.521,P<0.01）（2）PCR和测序证实,成功构建包含U6启动子和DLL4特异性RNA干扰片段的重组腺相关病毒载体pSNAV2.0-shRNA-DLL4,并制备出滴度为2.4×1011vectorgenome/L的高滴度腺相关病毒rAAV2-U6-DLL4-shRNA-EGFP;（3）重组腺相关病毒载体能明显抑制HUVECs细胞DLL4-mRNA和DLL4蛋白的表达（P<0.05）,促进HUVECs细胞株的生长增殖,细胞周期中G0/G1比例降低,S期比例明显上升,实验组细胞增殖指数为39.90±2.19%,对照组细胞的增殖指数为25.74±4.54%,P<0.05。HUVECs在Matrigel形成小管样结构能力增强,TLS长度均明显增加（P<0.05）;（4）rAAV2-U6-DLL4-shRNA-EGFP重组腺相关病毒能有效抑制荷瘤裸鼠肿瘤生长,肿块的体积和重量明显小于对照组（P<0.05）,肿瘤组织中微血管密度明显高于对照组,但肿瘤微血管形态以不成熟的点状型和线状型为主。肿瘤组织中的DLL4、Ephrin B2蛋白表达下降,与MVD者成负相关（r=-0.510,P<0.05; r=-0.410,P<0.05）。结论:①DLL4与胃癌组织新生血管生成及病理生物学行为关系密切,其表达水平可作为判断胃癌侵袭转移情况及患者预后的参考指标之一。②特异性阻断DLL4/Notch信号途径能有效促进HUVECs细胞增殖,增强HUVECs在Matrigel形成小管样结构能力。③特异性阻断DLL4/Notch信号途径能有效抑制荷瘤组织中EphrinB2表达,导致肿瘤微血管发育、成熟受阻,从而有效抑制肿瘤组织的生长。④DLL4/Notch信号途径有望成为胃癌抗血管生成治疗的新靶点。