守宫硫酸多糖对肝癌SMMC-7721细胞分化和增殖的影响

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:show20090907
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目的:研究守宫硫酸多糖(Gepsin)对肝癌SMMC-7721细胞分化和增殖的影响,并进一步探讨其相关机制。方法:培养肝癌SMMC-7721细胞,并进行细胞增殖与活细胞比率测定,研究守宫硫酸多糖对其影响;测定SMMC-7721细胞加药组和对照组培养7天分泌的AFP和ALB,观察Gepsin对肝癌细胞蛋白分泌的影响;ELISA法检测其培养上清中细胞因子TGF-β1、VEGF的分泌量;光镜下观察Gepsin对SMMC-7721细胞形态的影响。结果:经过Gepsin加药后30分钟、24,48,72,96,120,144小时分别收集细胞,台盼兰染色,光学正置显微镜下计数死细胞与活细胞,作生长曲线结果如下:即三组之间两两比较均有显著性差异,即随着处理组Gepsin的浓度升高,SMMC-7721细胞的增殖明显受到抑制P<0.01;Gepsin对对照组Gepsin高剂量组(100μg/ml)和Gepsin低剂量组(10μg/ml)的细胞活率的影响相比较:P为0.333>0.05,无显著性差异。且细胞活率较高,均在90%以上;加药组培养上清中分泌的ALB明显较对照组升高,且Gepsin高剂量组(100μg/ml)和Gepsin低剂量组(10μg/ml)相比较,高剂量组分泌的ALB含量较低剂量组明显增多(P<0.05);SMMC-7721细胞培养上清中分泌的AFP含量3组均有差异,对照组分泌的AFP最多,低剂量组居中,高剂量组分泌的AFP最少(P<0.05)。在光学显微镜下观察细胞形态改变:对照组SMMC-7721光镜下的正常形态为圆形,加入Gepsin后细胞的形态发生明显变化,变为纺锤形。各组培养上清细胞因子的分泌量相比较:VEGF:对照组与Gepsin高剂量组(100μg/ml)和Gepsin低剂量组(10μg/ml)相比较,P>0.05,没有显著性差异。对照组与苏拉明组比较P<0.01,有显著性差异。TGF-β1:对照组与Gepsin高剂量组(100μg/ml)相比,P<0.01,有显著性差异。Gepsin高剂量组(100μg/ml)的TGF-β1明显升高。结论:(1)Gepsin可明显抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖。(2)Gepsin不影响SMMC-7721细胞的存活。(3)Gepsin诱导SMMC-7721细胞分化。(4)Gepsin抑制肿瘤与VEGF表达无关,可能通过上调TGF-β1来诱导肝癌细胞分化。
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