外源开花素基因FT对安祖花遗传转化的研究

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在花卉的基因工程育种中,花期调控是重要的一个研究方向。本研究的主要目标是利用农杆菌介导的基因转化方法,采用热激诱导的组成型表达载体,将大豆热激蛋白启动子连接拟南芥或杨树的FT基因对安祖花进行转化,获得转化植株,待转化植株生长到一定阶段后诱导FT基因的表达,从而对外源FT基因对安祖花开花的影响进行研究,并探索利用FT基因控制花卉开花时间的方法。主要研究结果:建立了根癌农杆菌介导的安祖花遗传转化体系。以安祖花叶柄为转化受体,在OD600=0.6的菌液中浸染15min,再在黑暗条件下于含100μmol/L乙酰丁香酮的共培养基中培养3d可获得最佳的T-DNA转化效率。利用此优化的转化系统进行农杆菌的浸染,并在含卡那霉素100mg/L和头孢霉素300mg/L的筛选培养基上进行筛选,得到抗性愈伤组织,待其增殖到一定大小,分化成苗,再进行生根壮苗培养,最后对这些抗性苗进行PCR及GFP荧光检测。本实验分别获得了pJCGLOX-AtFT转化植株8个细胞系,pJCGLOX-PttFT1转化植株1个细胞系,为进一步的研究奠定了基础。
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