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猫乳腺肿瘤(Feline mammary carcinoma,FMC)是猫科动物最常见的恶性肿瘤之一,其主要发病原因是激素紊乱,发病机制尚不明确,缺乏有效的早期诊断生物标示物和诊断方法。该病发现越晚、瘤体越大,治疗难度越大,生存几率越小,因此早期诊断生物标示物的寻找,具有极为重要的临床意义。本试验采用非标记定量蛋白质组学筛选和鉴定猫乳腺肿瘤差异表达蛋白,运用生物信息学技术分析差异表达蛋白质的功能及参与的生物学过程、代谢途径,以期找出可用于早期诊断的生物标示物。应用PRM蛋白质靶向验证技术,对乳腺肿瘤血清中差异蛋白进行定量验证。试验利用非标记定量蛋白质组学技术对猫乳腺恶性肿瘤组(WEC)、良性肿瘤组(WLC)、健康组(WN)进行差异蛋白解析,每组样本6例试验猫,三组样本组内混合后进行蛋白含量测定、酶切、质谱分析,应用Maxquant软件、uniprot Felinae fasta数据库筛选、鉴定差异蛋白,应用生物信息学技术对差异蛋白进行分析。应用PRM蛋白质靶向验证技术对三组样本(组内混合处理)进行蛋白测定、Trypsin酶解、质谱分析与鉴定,结合Proteome Discoverer软件对质谱数据进行鉴定及定量分析。试验获得了猫乳腺肿瘤血清差异表达蛋白的labbel-free图谱,运用质谱技术和生物信息学分析获得差异蛋白267个。与健康组相比,恶性肿瘤组中有82个差异蛋白(55个下调,27个上调);与健康组相比,良性肿瘤组中有66个差异蛋白(37个下调,29个上调);与良性肿瘤组相比,恶性肿瘤组中有81个差异蛋白(37个上调,44个下调);GO分析显示,差异蛋白参与的生物过程显著富集在免疫系统过程、信号转导;分子功能显著富集在受体结合;细胞位置显著富集在细胞外区域、细胞膜、质膜;KEGG分析结果显示涉及的主要代谢通路为补体和凝血级联、胆固醇代谢;PPI分析显示,有16种差异蛋白同时在恶性肿瘤组、良性肿瘤组、健康组相互作用网络中出现。结合GO分析、KEGG分析和PPI分析,APOA2、APOC3、APOB为共同参与蛋白,提示这些差异蛋白与恶性肿瘤之间存在关联。PRM蛋白质靶向验证结果显示参与定量的6种蛋白结果与蛋白组学结果趋势非常一致。试验明确了猫乳腺肿瘤组织病理学特征。应用labbel-free非标记定量蛋白质组学技术结合生物信息学技术,成功鉴定了差异蛋白113种。结果表明APOA2、APOC3、APOB、F5、F10、C1Q这6种蛋白,补体和凝血级联、胆固醇代谢2个信号通路与猫乳腺肿瘤的发生密切相关。本研究为进一步筛查猫乳腺肿瘤的早期诊断生物标示物和深入揭示猫乳腺癌发生发展的分子基础提供了试验依据。