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人泡沫病毒(human foamy virus,HFV)于1971年被分离发现,是最早发现的人逆转录病毒。除了与其它逆转录录病毒一样含有5’LTR(long terminal repeats,LTR)、3’LTR和结构基因gag,pol,env以外,HFV还包含有一个位于env基因3’端的内部启动子IP(intemal promoter,IP)和四个调控基因的开放阅读框:bel1,bel2,bel3和bet(位于env基因和3’LTR之间)。HFV在人和动物细胞中有广泛的宿主范围,能感染多种类型的细胞,并且能有效的感染非分裂细胞;HFV有较大的基因组,具有转移大分子量的外源基因或多个外源基因的潜力:并且HFV不被人血清灭活;尤为重要的是HFV无明显的致病作用。因此,人泡沫病毒构建的载体被认为是一种安全有效的基因治疗载体。 本室在人泡沫病毒原病毒全长克隆pHSRV13的基础上,缺失病毒基因组的env基因和bel基因,保留其内部启动子IP构建了一个表达标记基因neo和报告基因EGFP的重组人泡沫病毒载体质粒pGPSNI-GFP。尽管pGPSNI-GFP提高了病毒载体的安全性,但是其不能单独产生病毒颗粒,需要辅助质粒提供病毒复制必需的结构基因才能产生有感染性的病毒颗粒。因此,我们在人泡沫病毒原病毒全长克隆pHSRV13的基础上,缺失突变了gag和pol基因,并且用SV40polyA加尾信号替代人泡沫病毒的3’LTR,构建了辅助质粒p△GP提供给复制缺陷型病毒复制所必需的结构基因。将复制缺陷型人泡沫病毒载体pGPSNI-GFP和辅助质粒p△GP分别转染以及共转染人小肠癌细胞(human intestine cell,HIC),荧光显微镜检测发现共转染pGPSNI-GFP和p△GP的HIC细胞能够强烈表达绿色