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目的：根据小檗碱（berberine, BBR）对糖尿病肾病大鼠（diabetic nephropathy, DN）肾脏病理形态学的改善及血糖血脂的调节，观察BBR对DN大鼠肾功能的保护作用，检测G蛋白偶联受体激酶（G-protein-coupled receptor kinases, GRKs）的表达情况及BBR对其的影响；并初步探讨BBR对DN大鼠的作用特点及BBR对GRKs的影响与其保护大鼠肾功能的关系。方法：雄性SD大鼠先给予高脂饲料6周以后，在禁食不禁水12h条件下，一次性腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin, STZ）35mg/kg，诱导建立糖尿病模型。72h后测定空腹血糖值,以血糖值≥11.1mol/L纳入实验,符合条件的动物随机分为7组（n=10），即模型组、BBR组（50、100、200mg/kg）和阳性药对照组（依那普利、消渴丸和辛伐他汀），另设正常对照组和高脂对照组。持续每天一次灌胃给药（intragastric administration, ig）并继续高脂饮食8周，实验期间观察大鼠的一般状况，每一周称大鼠体重，每两周尾尖取血测血糖。给药满8周后，将大鼠放入代谢笼中，收集24h尿液；然后股动脉采血，分离血清，检测大鼠的24h尿蛋白总量（UP24h）、24小时尿微量白蛋白（UMAlb）、尿肌酐（UCr）、尿素氮（BUN）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、血肌酐（SCr）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）。取大鼠肾脏,并称重，计算相对肾重（肾重/体重，KW/BW）；光学显微镜观察HE染色及Masson染色后肾脏组织病理学变化；透射电镜下观察肾小球的超微结构；免疫组化法检测大鼠肾脏皮质纤维连接蛋白（Fibronectin, FN）、IV型胶原(collegen type IV)、转化生长因子-1（Transforminggrowth factor-β1, TGF-β1）及结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）的表达情况；Western blotting法检测肾皮质的GRKs蛋白表达水平；放免法检测肾皮质中cAMP水平。结果：1BBR对DN大鼠血糖水平和体重的影响与正常组比较, DN模型组大鼠的血糖水平显著升高, BBR（100mg/kg,200mg/kg）组在给药第6~8周后,较模型组血糖显著下降。从给药第2周开始，模型组大鼠的体重与高脂对照组相比明显降低；从给药第3周开始，模型组大鼠体重与正常对照组比较显著降低；各给药组及阳性对照组可减缓模型大鼠体重的下降，但差异均无统计学意义。2BBR对DN大鼠肾功能指标及血生化指标的影响本实验结果发现，模型大鼠的KW/BW比值、微量白蛋白/尿肌酐比值（U.A/C）、总蛋白/尿肌酐比值（UP/C）、BUN、UCr、SCr、TG、TC、LDL-c水平比正常对照组显著升高，而HDL-c水平则显著下降；BBR（100mg/kg,200mg/kg）可改善DN大鼠的肾功能指标和生化指标水平的异常。3BBR改善DN大鼠肾脏组织病理学的表现与正常对照比较，DN模型大鼠光学显微镜下可见肾小球体积明显增大，基底膜增厚及系膜基质增多，部分肾小管细胞肥大,管腔变窄；部分伴有大量炎性细胞浸润，肾间质部分小血管玻璃样变；并见大量绿色深染的胶原纤维沉积在肾小球和肾小管部分。BBR给药后,肾小球改变轻微，少数肾小管轻度扩张，系膜轻度增生，炎性细胞浸润减少，仅有少量胶原纤维沉积，间质纤维化区域与模型组相比有所减轻。各阳性对照组也有类似上述的改善作用。4BBR对DN大鼠肾组织超微结构的影响电镜下观察发现，DN模型组与正常组相比肾小球肿胀变大，肾小球基底膜明显增厚，不平整，局部足细胞足突大片融合甚至消失；BBR（50,100mg/kg,200mg/kg）各给药组可不同程度地抑制肾小球基底膜增厚，有效地改善了足细胞的状态。5BBR降低DN大鼠肾脏组织中IV型胶原、FN蛋白、TGF-β1及CTGF的表达免疫组化结果显示，BBR（100mg/kg,200mg/kg）给药组可显著降低IV型胶原、FN蛋白、TGF-β1及CTGF的表达。6BBR调节DN大鼠肾皮质中GRKs蛋白的表达水平Westernblotting检测发现，与正常组相比，DN大鼠肾皮质中GRK2和GRK3表达明显升高，GRK4和GRK6蛋白表达有所降低；BBR（100,200mg/kg）给药可不同程度地下调DN大鼠肾皮质中增高的GRK2和GRK3蛋白表达水平，上调DN大鼠肾皮质中减少的GRK6蛋白表达水平，但对DN大鼠肾皮质中降低的GRK4表达水平没有明显影响，通过比较各组间GRK5蛋白表达均没有明显差异。7BBR对DN大鼠肾皮质中cAMP水平的影响放免法结果显示，DN模型组大鼠cAMP水平较正常组明显降低，BBR可明显上调cAMP水平。结论：1. BBR给药6周前对DN大鼠血糖的影响不明显，给药6~8周后，较模型组血糖显著下降；BBR可改善U.A/C比值、UP/C比值、BUN、SCr等肾功能指标；BBR给药可减缓模型大鼠体重的下降，但差异无统计学意义。提示BBR对DN大鼠的作用特点体现在可明显改善肾功能指标，同时经过长时间的给药才能对DN大鼠血糖产生明显改善作用；且随着实验时间的延长，对体重影响不明显。2. BBR给药8周后有效地改善了DN大鼠血生化指标，抑制肾脏IV型胶原、FN蛋白的过度产生和TGF-β1、CTGF炎性细胞因子水平，并改善U.A/C比值、UP/C比值、BUN、SCr等肾功能指标，从而减轻了糖尿病大鼠的肾脏进行性损害。提示BBR可阻止DN大鼠肾功能损伤。3. DN模型大鼠肾皮质GRKs蛋白表达水平及cAMP水平均出现异常，BBR给药不同程度地调控GRKs的表达，同时上调cAMP水平。提示G蛋白-AC-cAMP信号转导通路可能与BBR对DN大鼠肾脏的保护作用有关。