检测溴氰菊酯的胶体金免疫层析试纸条的研制

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拟除虫菊酯(Pyrethroids)类农药是一类重要的广谱性的杀虫剂,但最近有研究表明,长期低剂量接触菊酯类农药会引起慢性疾病,如免疫系统毒性,遗传毒性和心血管毒性等。因此,有效监管农产品中的拟除虫菊酯(Pyrethroids)类农药残留已成为人们广泛关注的问题。本研究以溴氰菊酯(deltamethrin)为研究对象,建立了一种简单快捷的检测溴氰菊酯的胶体金免疫层析试纸条的方法,并将其成功应用于河水样品的检测。该实验采用辛酸-硫酸铵法纯化得到溴氰菊酯的单克隆抗体,并采用柠檬酸三钠还原法制备了 30 nm的胶体金,优化制备金标抗体的最佳pH为8,标记抗体量为30 μg/mL。经过优化确定的胶体金免疫层析试纸条的最佳工作条件为:包被原的最佳稀释倍数为1:20;羊抗小鼠二抗的最佳稀释倍数为1:50;硝酸纤维膜选择Millipore 135s;包被稀释液为PBS缓冲溶液;最佳的标准品稀释液为含有5%甲醇的PBST溶液,金标垫处理液为含有0.01%BSA,0.05%SDS-L的PBS缓冲溶液。溴氰菊酯胶体金免疫层析试纸条方法目测检测限为10ng/mL,检测时间小于1Omin。河水样品的检测限为200ng/mL。本实验建立的溴氰菊酯的可视化免疫分检测方法操作简单,灵敏度高,检测结果易于判定,无需仪器,可作为溴氰菊酯残留现场检测的有效筛检手段。
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