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研究背景和目的 “益气健脾”是中医治疗脾虚证的重要治法。脾虚往往伴有胃肠黏膜的损伤。益气健脾中药对脾虚证的治疗作用之一可能是促进胃肠黏膜保护或者修复。 本实验室前期工作中在小肠隐窝干细胞(IEC-6)上以鸟氨酸脱羧酶(ODC)表达和多胺水平等为指标,发现白术、黄芪和甘草不同提取部位可以促进IEC—6细胞增殖、移行和分化。古方白术黄芪汤由白术、黄芪和甘草组成,将筛选出来的三药有效部位白术AMPS-Ⅱ、黄芪总皂苷、甘草总黄酮组成白术黄芪方。本研究以溃疡性结肠炎(UC)作为肠黏膜损伤的模型,观察该方的作用和ODC的变化,研究益气健脾中药的作用机理。 研究方法 1.以不同造模方案建立TNBS致UC动物模型。 2.UC大鼠分为模型对照组、阳性药组、白术黄芪方0.1g/kg、0.2g/kg、0.4g/kg组,灌胃给药14天后处死,通过比较大鼠一般状态、结肠大体形态和病理检测结果,得出白术黄芪方的有效剂量。 3.比较白术黄芪汤水提液(15g生药/kg)和白术黄芪方(0.3g提取物/kg)治疗大鼠UC的作用,造模后给药14天处死,观察一般状态、结肠大体形态和组织病理改变等。 4.UC大鼠分为模型组和白术黄芪方组,两组各在造模10天、20天、30天分三批处死,观察各时期大鼠整体状态和结肠的改变,以了解UC的病理演变过程及白术黄芪方的治疗作用。检测ODC的表达在UC病变过程中的改变及药物的影响。 5.通过小鼠炭末排出实验、湿粪点数、二甲苯致炎、醋酸扭体实验等观察白术黄芪方对胃肠运动的的影响及抗炎、镇痛效果等。并在小鼠结肠炎模型上观察髓过氧化物酶的影响。 6.白术黄芪汤水提液和白术黄芪方提取物急性毒性实验。 结果 1.TNBS致UC动物模型所受影响因素较多,例如动物体重、TNBS剂量、造模