论文部分内容阅读
对虾白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是一种具有囊膜、无包涵体的杆状型双链环状DNA病毒,也是严重危害对虾养殖业的最主要病原。本论文围绕病毒膜蛋白开展研究,包括以下两个部分。(1)质谱分析发现病毒膜蛋白VP38是ORF wsv259的编码产物。随后在E.coli BL-21菌株中表达纯化了GST-VP38并制备了相应的抗血清。利用Far-Western blotting和GST pull-down分析发现VP38和另一个病毒膜蛋白VP24有相互作用。进一步分别重组表达了VP38的N-端VP38n(aa 1-142)和C-端VP38c(aa 143-309),GST pull-down分析结果表明VP38与VP24的相互作用位点在C-端。(2)WSSV ORF wsv 011编码产物VP150是病毒中一个比较独特的膜蛋白,由1301个氨基酸组成,预测分子量约144kDa。质谱分析发现在病毒粒子中VP150存在降解现象。从vp150基因的两端各选约600 bp,分别命名为vp150n、vp150c,而后在E.coli BL-21菌株中表达纯化了VP150n和VP150c并制备了相应的抗血清。通过Western blot初步发现从血液中和组织中提纯的WSSV病毒粒子中VP150降解程度存在区别,推测它是病毒成熟过程中的重要蛋白。对病毒膜蛋白性质以及它们之间相互作用研究是了解病毒入侵、包装、成熟和释放的重要步骤,将为防治病毒奠定科学依据。