【摘 要】
：
目的:探究锌指转录因子ZFP580与心肌缺氧/复氧损伤过程中内质网应激引起细胞凋亡的关系。方法:培养大鼠H9C2心肌细胞,分为实验组与对照组,实验组:缺氧3h复氧0h、0.5h、1h、2h
论文部分内容阅读
目的:探究锌指转录因子ZFP580与心肌缺氧/复氧损伤过程中内质网应激引起细胞凋亡的关系。方法:培养大鼠H9C2心肌细胞,分为实验组与对照组,实验组:缺氧3h复氧0h、0.5h、1h、2h。每组均设3个复孔。细胞流式技术检测细胞损伤情况。蛋白免疫印迹技术检测心肌细胞中内质网应激标志蛋白GRP78及细胞凋亡标志蛋白Caspase-12、CHOP、以及研究分子ZFP580的表达。利用腺病毒介导的基因转染获得高表达ZFP580的H9C2心肌细胞,转染72h后,检测心肌细胞中Caspase-12、CHOP的表达。利用腺病毒介导的基因转染沉默技术获得低表达ZFP580的H9C2心肌细胞,并检测心肌细胞中Caspase-12、CHOP的表达。MTT检测细胞存活率。利用Annexin V-PE/7-AAD染色进行流式凋亡检测及DAPI染色方式检测细胞凋亡状况。结果:H9c2心肌细胞经3h缺氧后0min、30min、1h、2h不同时间点的复氧处理后,(1)内质网应激标志蛋白GRP78的表达量从复氧30min开始持续升高至复氧2h(p<0.05)(2)ZFP580的蛋白表达量从复氧30min开始持续升高至复氧2h,1h升高最为显著(p<0.05)。(3)缺氧复氧引起细胞凋亡分子Caspase-12、CHOP、p-JNK的表达变化,p-JNK蛋白表达量从复氧0min开始升高,30min升至高峰,Caspase-12蛋白表达量从复氧0min开始升高,1h升至高峰,CHOP蛋白表达量从复氧30min开始升高,1h升至高峰(p<0.05)。(4)流式结果显示在复氧0min开始心肌细胞凋亡率升高,在复氧30min时凋亡降低,复氧2h时细胞凋亡率升高(p<0.05)。(5)细胞的存活曲线结果显示从复氧0min开始存活率开始降低,于30min开始升高1h为最高点,2h降低,但相对正常组仍为降低(p<0.05)。(6)Ad-ZFP580转染组的H9C2心肌细胞,在经3h缺氧1h复氧处理后,ZFP580蛋白表达上调(p<0.05),Caspase-12的表达下降(p<0.05);Ad-si ZFP580转染组的H9C2心肌细胞,在经3h缺氧1h复氧处理后,ZFP580蛋白表达下降(p<0.05),Caspase-12的表达上升(p<0.05)。(7)吉姆萨染色显示正常细胞的细胞核染色均匀,凋亡细胞的细胞核固缩深染,呈蓝紫色。Ad-si ZFP580转染组的细胞吉姆萨染色细胞核固缩数目较Ad-ZFP580转染组的细胞核固缩数目多。(8)MTT检测酶标仪结果显示Ad-si ZFP580转染组的OD值降低。Ad-ZFP580转染组的H9C2心肌细胞的OD值升高(p<0.05)。(9)DAPI染色显示正常H9C2心肌细胞胞核染成蓝色,染色均匀,凋亡心肌细胞胞核染色固缩聚集呈亮蓝色,呈小颗粒状为凋亡小体。Ad-si ZFP580转染组的H9C2心肌细胞的细胞呈亮蓝色固缩状细胞核数目升高。Ad-ZFP580转染组的H9C2心肌细胞的亮蓝色数目降低(p<0.05)结论:1.缺氧复氧诱导后心肌细胞存活率降低,凋亡率增高,即心肌细胞缺氧复氧引发凋亡。2.缺氧复氧引起心肌细胞GRP78升高,即产生内质网应激。3.ZFP580通过调控内质网特有凋亡因子Caspase-12的表达进而影响内质网应激介导的凋亡。
其他文献
乳腺癌作为常见的女性肿瘤,也是导致女性死亡的重要原因。当前我国乳腺癌发病率增长较快并呈现出年轻化趋势。因此,乳腺癌依然是威胁我国女性健康的重大公共卫生问题。目前乳腺癌病因复杂,与遗传和环境因素密切相关。处于相同环境条件下,乳腺癌风险也会因为遗传差异而不同,这提示遗传变异对其发生进展有着重要影响。因此,通过遗传易感性研究,开展风险预测有助于筛选乳腺癌的高危人群和实施有效的预防措施,降低其发病风险。G
当今社会数据总量急剧增长,传统的数据存储方案面对海量数据的存储显得无能为力,而分布式存储系统因具有易扩展、低成本等优势,逐渐成为存储海量数据的绝佳选择。分布式存储系统由众多廉价、不可靠的节点组成,随着系统规模的不断扩展,节点数量的持续增加,系统中存储节点出现故障将成为常态,这就需要采用容错技术来提升存储可靠性。容错技术主要包括副本技术和纠删码技术。副本技术是将数据进行多次备份,虽然可以有效保障数据
资本配置是现代经济社会资源配置的一个核心主题,资本配置效率与金融市场和实体经济发展是否同步的问题紧密相关,若金融“超发展”,会导致经济脱实向虚,若金融市场滞后于实体经济需要,则导致实体经济缺乏资本支持,这两种情况在中国不同区域同时存在,导致了我国整体资本配置效率较为低下。与此同时,中国经济“双轨制”发展内在的包含着资本配置由市场和政府两种途径共同决定,市场即金融市场,目前学术界的研究普遍认为金融发
为了探究不同理化属性燃油在发动机缸内复杂环境下的蒸发过程,设计高温高压单液滴蒸发试验系统,选用理化属性差异较大的三种烷烃:正庚烷、正十二烷和正十六烷及其两两互混物
据2019年中国互联网络信息中心(CNNIC)发布的数据,中国网络用户量于2018年12月达到了8.29亿,98.6%网民使用移动设备接入互联网。相较于传统接入渠道,用户更倾向于通过移动设备接入网络。移动设备提供快速、便捷的互联网接入服务,但其设备种类繁多、硬件参数及性能表现参差不齐,难以提供一致的互联网服务接入体验。最典型的就是网页浏览体验,由于移动设备分辨率及浏览平台的差异,很多传统网站对于移
1920年代以来,由于多种历史原因,来自祁连山东坡甘肃省和祁连山西坡青海省的村民分别向两省边界的祁连山山脉地区迁移,最终汇聚在祁连山深处“脑山”的灰村,发展形成了一个“山脊型”的村庄,经过1934年至2000年的发展,灰村人口逐渐增长,村庄也逐步发展壮大。灰村在发展过程中,在2000年到2010年以来由于其内部原生资源已经不能满足其自身发展需求,加之外界更广阔发展空间的巨大吸引,他们转而又陆续“下
目的:本课题通过观察白虎加人参汤加减联合西医治疗阴虚热盛型糖尿病酮症酸中毒(DKA)的临床疗效以及对糖代谢、血尿酮体、血气分析、氧化应激指标及缺血性修饰白蛋白等的影响,以探讨白虎加人参汤对糖尿病急性并发症的临床疗效和可能的作用机制,为中医药治疗DKA提供临床依据。方法:采用临床观察的方法,根据纳入标准、排除标准选取92例患者,根据随机对照原则分为对照组和治疗组。对照组给予单纯西医治疗,治疗组在西医
气动调节阀在化工、纺织、石油、制药、冶金等大型过程控制领域具有广泛的应用,这是因为气动调节阀具有使用可靠、易于维护、操作方便、结构简单等优点。气动调节阀要实现高
员工的创造力是组织迈向创新的第一步,为激发员工创造力,传统的研究主张消除其创造过程中各种可能的约束和限制,并认为外部约束降低员工内部动机而不利于员工创造力发挥。然而组织员工不可避免面临各种约束,如资源、规则、制度等客观条件限制。鉴于组织约束的普遍性和不可避免性,有必要探讨在组织约束情境下如何激发员工创造力。这引起了战略管理、技术和运营管理以及组织行为学等领域诸多学者的关注,尤其近几年,越来越多的领
目的:本课题为优化痰湿蕴肺型咳嗽常规推拿组方中“咳穴”的操作手法,将小儿推拿痰湿咳嗽常规治疗组方中的“咳穴”操作手法改为轻揉法,与临床常规小儿推拿痰湿咳嗽组方的治疗疗效对比,客观评价轻揉“咳穴”组方治疗小儿肺炎恢复期痰湿蕴肺证的临床疗效。为临床治疗小儿肺炎恢复期痰湿蕴肺型咳嗽提供更安全、有效、易被接受的治疗方法。方法:本研究采用临床随机对照试验方法,收集自2018年12月至2019年12月就诊于广