硝酸盐是蔬菜中常见的污染物,其在蔬菜中的含量超过限量将对人体健康造成危害。随着人民生活水平的提高和食品安全意识的增强,国家对食品安全监控力度的加大,简单易用、快速、准确、低成本的硝酸盐检测方法有着巨大市场需求。本文开发了一种快速、准确测定蔬菜中硝酸盐含量的一种新的氯化钒混合粉剂方法。首先采用单因素实验研究了混合粉剂中氯化钒、氯化钠、氨基磺酸、对氨基苯磺酸和盐酸萘乙二胺各自用量以及反应温度、反应时间对硝酸盐含量测定结果的影响,通过Plackett-Burman实验从上述7个影响因素中筛选出3个对检测结果有显著影响的因素,进一步采用3因素3水平的响应面分析实验研究了3个显著因素之间的交互效应,通过对实验结果进行模型拟合和回归方程分析,摸索出氯化钒混合粉剂的最佳比例以及反应的最佳条件;同时开发出适合本测定方法的蔬菜样品前处理方法,最后运用方法学对所开发的方法进行了方法学评估。具体研究结果如下:(1)研发了一种能够快速检测硝酸盐含量的氯化钒混合粉剂法,混合粉剂中氯化钠、氨基磺酸、对氨基苯磺酸、盐酸萘乙二胺、氯化钒混的的最佳比例为400:20:25:0.9:0.6,混合粉剂总用量为0.3g,粉剂的稳定时间为2个月;测定时将混合粉剂加入3mL样液中,摇匀使粉剂完全溶解,80℃水浴加热30min,冷却,538 nm下测定吸光值,通过标准曲线计算求出硝酸盐含量;(2)由于所研发的氯化钒粉剂法具有灵敏度高,检测限低的特点,含较高硝酸盐含量的蔬菜样品需要较高的稀释倍数,使叶绿体色素不会干扰显色效果,因此改进了蔬菜样品的前处理方法,直接提取后,无需对样液进行净化,具体方法为:称取5~10g蔬菜匀浆,加入2%醋酸溶液提取,再用2%醋酸溶液定容至250mL,振荡5min,过滤,滤液用于测定;(3)通过方法学评估,氯化钒粉剂法的线性范围为0~2.5mg/L,线性方程y=0.5011x-0.0223,相关系数r=0.999;最低检测限为0.3mg/L,加标回收率在97.3%~106.1%范围内,变异系数在1.40%~7.91%之间;氯化钒还原硝酸盐的还原率达到87.10%~94.10%,表明氯化钒粉剂法具备良好的准确性和重现性,精密度较高,结果可靠。所建立的方法针对文献报道的锌粉法存在还原率较低,方法准确性较差的问题,提出用氯化钒代替锌粉,同时采用氯化钠和氨基磺酸作为氯化钒还原硝酸盐需要酸性条件的产酸试剂,成功将还原剂、酸性剂、重氮化试剂和偶合试剂混合在一起,提高了还原率和准确性,减少了检测过程中的操作步骤。