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近年来,随着现代生活饮食模式的改变,非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的发病率逐年增加。NAFLD是一种典型的慢性肝脏疾病,如不及时进行干预,会逐渐发展为脂肪性肝炎,进一步引发肝纤维化、肝硬化,最终可能发展为肝癌。因此,通过膳食干预预防NAFLD的发生及发展具有重要意义。植物甾醇酯(Phytosterol ester,PSE)是植物甾醇(Phytosterol,PS)的酯化产物,可在体内被酯酶被水解为PS,发挥和PS相同的生理功能,如降胆固醇、抗氧化和抗炎。本研究在利用高脂饮食建立大鼠NAFLD模型的同时,分别灌胃给予低(0.05 g/100 g BW/d)、高剂量PSE(0.10 g/100 g BW/d)牛奶,通过检测各组大鼠血生化指标、结肠内容物和粪便的短链脂肪酸水平、肠道菌群的变化,以及肝脏和肠道紧密连接蛋白mRNA的表达,深入探究PSE对NAFLD的预防作用及其机制。研究结果如下:(1)在血生化指标方面,与模型组相比,低剂量PSE干预可显著降低大鼠血清中TC、LDL-C和AST的水平(p<0.05),显著增加血清HDL-C水平(p<0.05);高剂量PSE干预除可显著降低大鼠血清ALT水平以外(p<0.05),其他干预效果与低剂量PSE相似。同时,低、高剂量PSE干预均可明显降低NAFLD大鼠腹脂指数和肝脏指数(p<0.05);病理切片结果显示,低、高剂量PSE干预后,大鼠肝脏脂肪变性程度明显减轻。(2)肠道菌群RT-qPCR的结果显示,与模型组相比,低剂量PSE干预可增加乳杆菌属、肠杆菌属、肠球菌属、拟杆菌属的相对数量,降低双歧杆菌属的相对数量(p>0.05);而高剂量PSE干预除可增加乳杆菌相对数量外,对其他四种菌属无明显影响(p>0.05)。16S rDNA测序结果显示,NAFLD大鼠肠道菌群种类和丰度与正常对照组有较大差异。高剂量PSE干预后,其菌群Chao1指数、Shannon指数、分类学组成均与正常对照组相近;功能类群分布显示,高剂量PSE干预可提高肠道菌细胞运动、遗传信息的翻译和复制与修复的功能类群丰度,并改善聚糖生物合成和代谢、脂质代谢和核苷酸代谢功能基因类群分布,其结果与正常对照组相近。(3)低、高剂量PSE干预可不同程度地降低大鼠结肠内容物中短链脂肪酸的水平。同时,与模型组相比,低剂量PSE干预还可升高大鼠粪便中异丁酸(98.99%)、戊酸(44.89%)、异戊酸(60.10%)水平(p>0.05);高剂量PSE干预可升高粪便中戊酸(44.86%)水平(p>0.05),并显著升高异丁酸(188.14%)和异戊酸(118.92%)水平(p<0.05)。(4)低、高剂量PSE干预均可降低NAFLD大鼠血浆内毒素水平。同时,低剂量PSE干预还可极显著上调NAFLD大鼠结肠组织claudin-1的表达(p<0.01);而高剂量PSE干预则可显著上调occludin的表达(p<0.05)。在肝脏通透性方面,低、高剂量PSE干预均可极显著下调大鼠肝脏内claudin-2表达(p<0.01);除此之外,高剂量PSE干预还可显著上调claudin-3和occludin的表达(p<0.05)。结论:PSE可以纠正高脂饮食引起的NFALD大鼠肠道菌群紊乱,调节肠道微生物的功能类群分布,并纠正结肠和粪便内短链脂肪酸的异常水平,维持良好的肝、肠通透性,从而对NAFLD的发生发展起到预防作用。