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胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,在我国其发病率和死亡率均居各类肿瘤的首位。胃癌的发生是一个多因素、多步骤的过程,涉及到多方面机制,目前认为胃癌的发病机理可能与Cx32、E-cad及Tau蛋白有关。
本实验通过比较Cx32、E-cad及Tau蛋白在正常胃组织及胃癌中的表达来分析三者与胃癌临床病理学指标(分化程度、淋巴结转移)的关系及其相关关系,为研究胃癌的发病机理提供理论依据,同时也为临床治疗胃癌提供新的作用靶点。
第一部分缝隙连接、缝隙连接蛋白Cx32变化与胃癌关系的研究
目的:
通过免疫组织化学法和RT-PCR技术检测Cx32阳性信号、Cx32mRNA在正常胃组织及胃癌组织中的变化以及利用透射电镜在超微结构下观察缝隙连接结构的改变来揭示Cx32与胃癌的关系。
方法:
收集承德医学院附属医院2008年12月至2010年3月手术切除标本,经病理证实为胃癌组织标本60例,正常胃组织(距离肿瘤10cm以外作为正常胃组织)10例。采用免疫组织化学法标记Cx32,检测其在正常胃组织及胃癌组织中的表达情况;通过透射电镜技术观察正常胃组织与胃癌组织中缝隙连接的变化;利用RT-PCR技术检测Cx32mRNA在正常胃组织与胃癌组织中的表达水平,结合临床病理学资料对实验数据进行统计学分析。
结果:
1.免疫组化结果
1.1 Cx32在胃癌组织中的表达低于在正常胃组织中的表达(P<0.05)。
1.2胃癌组织中高中分化者Cx32的表达高于低分化者的表达(P<0.05)。
1.3胃癌组织中无淋巴结转移者Cx32的表达低于有淋巴结转移者的表达(P<0.05)。
2.电镜结果
胃癌组织超微结构中细胞缝隙连接破坏。
3.RT-PCR结果
3.1 Cx32 mRNA在胃癌组织中的表达低于在正常胃组织中的表达(P<0.05)。
3.2胃癌组织中高中分化者Cx32 mRNA的表达高于低分化者的表达(P<0.05)。
3.3胃癌组织中无淋巴结转移者Cx32 mRNA的表达低于有淋巴结转移者的表达(P<0.05)。
结论:
1.免疫组织化学Cx32的阳性信号在正常胃组织和胃癌组织中的表达有显著差异,且与胃癌的分化程度和有无淋巴结转移有关。
2.正常胃组织中细胞间的缝隙连接结构完整,而胃癌组织中细胞间的缝隙连接遭到破坏,结构不完整。
3.Cx32 mRNA在正常胃组织和胃癌组织中的表达有显著差异,且与胃癌的分化程度和有无淋巴结转移有关。
第二部分钙黏蛋白E—cad、微管聚合蛋白Tau与胃癌关系的研究
目的:
通过免疫组织化学法和RT-PCR技术检测E-cad和Tau蛋白在正常胃组织及胃癌组织中的变化,以此来研究E-cad和Tau蛋白与胃癌的关系。
方法:
收集承德医学院附属医院2008年12月至2010年3月手术切除标本,经病理证实为胃癌组织标本60例,正常胃组织(距离肿瘤10cm以外作为正常胃组织)10例。采用免疫组织化学法标记E-cad和Tau蛋白阳性信号在正常胃组织及胃癌组织中的表达情况;利用RT-PCR技术检测E-cad和Tau蛋白在正常胃组织与胃癌组织中mRNA的表达水平,结合临床病理学资料对实验数据进行统计学分析。
结果:
1.免疫组化结果
1.1 E-cad在胃癌组织中的表达低于在正常胃组织中的表达(P<0.05);Tau蛋白在胃癌组织中的表达高于在正常胃组织中的表达(P<0.05)。
1.2胃癌组织中高中分化者E-cad的表达高于低分化者的表达(P<0.05);胃癌组织中高中分化者Tau蛋白的表达低于低分化者的表达(P<0.05)。
1.3胃癌组织中无淋巴结转移者E-cad的表达高于有淋巴结转移者的表达(P<0.05);胃癌组织中无淋巴结转移者Tau蛋白的表达低于有淋巴结转移者的表达(P<0.05)。
2.RT-PCR结果
2.1 E-cad mRNA在胃癌组织中的表达低于在正常胃组织中的表达(P<0.05);Tau mRNA在胃癌组织中的表达高于在正常胃组织中的表达(P<0.05)。
2.2胃癌组织中高中分化者E-cad mRNA的表达高于低分化者的表达(P<0.05);胃癌组织中高中分化者Tau mRNA的表达低于低分化者的表达(P<0.05)。
2.3胃癌组织中无淋巴结转移者E-cad mRNA的表达高于有淋巴结转移者的表达(P<0.05);胃癌组织中无淋巴结转移者Tau mRNA的表达低于有淋巴结转移者的表达(P<0.05)。
结论:
1.免疫组织化学阳性信号E-cad和Tau蛋白在正常胃组织和胃癌组织中的表达均有显著差异,且与胃癌的分化程度和有无淋巴结转移有关。
2.E-cad mRNA和Tau mRNA在正常胃组织和胃癌组织中的表达均有显著差异,且与胃癌的分化程度和有无淋巴结转移有关。
第三部分 Cx32、E—cad及Tau蛋白在胃癌中相关关系的研究
目的:
通过对Cx32、E-cad及Tau蛋白实验数据的分析研究三者在胃癌中的相关关系。
方法:
通过统计学软件分析Cx32、E-cad及Tau蛋白的实验数据。
结果:
1.Cx32与E-cad的相关系数:r=0.67(P<0.01);Cx32与Tau蛋白的相关系数:r=-0.47(P<0.01);E-cad与Tau蛋白的相关系数:r=-0.42(P<0.01)。
2.Cx32 mRNA与E-cad mRNA的相关系数:r=0.88(P<0.01);Cx32mRNA与Tau mRNA的相关系数:r=0.88(P<0.01);E-cad mRNA与TaumRNA的相关系数:r=-0.81(P<0.01)。
结论:
在胃癌中Cx32与E-cad具有正相关性,Cx32 mRNA与E-cad mRNA具有正相关性;Cx32与Tau蛋白具有负相关性,Cx32 mRNA与Tau mRNA具有负相关性;E-cad与Tau蛋白具有负相关性,E-cad mRNA与TaumRNA具有负相关性。