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光甘草定是世界上最昂贵的天然祛斑美白成分,是世界上公认的最安全的祛斑美白成分,因其还有多种生理活性而具有潜在的应用价值。然而由于其本身含量微少,导致其提取纯化过程繁复且低效,加上目前国内外对其含量检测只停留在昂贵、费时的高效液相色谱法上,所以该产品价格非常昂贵。本实验针对以上问题主要研究了光甘草定的定量测定方法,优化了光甘草定的提取工艺,确定了大孔吸附树脂法纯化光甘草定的工艺条件,测定了光甘草定的抑制酪氨酸酶活性。具体研究内容及结果如下:1.利用香草醛在酸性条件下可与光甘草定反应生成有颜色的复合物这一实验基础,对酸化香草醛法进行了系统的研究,找到了适合于光甘草定含量测定的比色条件。结果表明:（1）以H2SO4作为反应的酸性介质,比色条件为:空白:0.5mL甲醇+2.5mL 2%香草醛+2.5mL 30%硫酸;香草醛空白:0.5mL样品甲醇溶液+2.5mL甲醇+2.5mL 30%硫酸;样品测定:0.5mL样品甲醇溶液+2.5mL 2%香草醛+2.5mL 30%硫酸,20℃反应20min后测定A534。（2）方法评价结果表明该方法重现性好、回收率高,并且检测灵敏度高、稳定性好,是一种快速准确的测定光甘草定含量的方法。2.采用有机溶剂提取的传统方法,以光甘草定提取率为指标,采用单因素实验研究提取温度、提取次数、提取时间、料液比、工业甲醇浓度以及甘草渣粒度对光甘草定得率的影响。通过单因素实验确定出较优因素范围后,采用响应面法优化甘草渣中光甘草定提取工艺。结果表明:在提取时间64 min,提取温度50.4℃,料液比1:38.5g/ml,提取次数1次,工业甲醇浓度100%,甘草渣粒度40目的最优提取条件下,光甘草定得率预测值为0.52%,验证值为0.51%。3.研究比较了多种大孔吸附树脂的静态吸附特性,筛选出了适宜光甘草定纯化的树脂,并确定了固定床吸附和解吸的工艺参数。结果表明:沧州宝恩HPD-400、安徽三星YPR-Ⅱ和安徽三星X-5三种树脂的吸附率和解析率较高。三种树脂的吸附动力学行为符合二级吸附速率方程,吸附等温线可用Freundlich等温吸附方程描述。在相同温度下,光甘草定在沧州宝恩HPD-400树脂的吸附行为更容易实现,因此选择沧州宝恩HPD-400树脂作为光甘草定纯化的树脂。光甘草定在HPD-400树脂上的穿透曲线实验数据可用Bohart-Adams模型方程拟合,拟合公式可用于近似指导给定操作条件下光甘草定穿透时间的计算。光甘草定提取液经过HPD-400树脂动态吸附分离的适宜上样浓度为0.845mg·mL-1 ,上样流速为3BV·h-1;洗脱溶剂为70%乙醇,洗脱流速为2BV·h-1。上述操作条件下,光甘草定纯度可由4.5%提高到21.8%。4.以光甘草定作为效应物,研究其对酪氨酸酶单酚酶及二酚酶的影响及抑制作用动力学,得到有关动力学参数,并与抗坏血酸、曲酸及甘草提取物的抑制效果进行比较。结果表明:光甘草定是一种高效的美白剂,对酪氨酸酶单酚酶的半抑制率为58.9μg/ml,对二酚酶的半抑制率为22.7μg/ml,以L-DOPA为底物时光甘草定表现为非竞争性抑制类型。