加味关节康对佐剂性关节炎大鼠免疫学炎症的影响

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目的:以类风湿关节炎(RA)自身免疫性炎症为切入点,为研究中药复方治剂对类风湿免疫性炎症的抑制,探讨中药复方制剂加味关节康对佐剂性关节炎大鼠免疫学炎症的影响。  方法:实验于2007-10/12在解放军第208医院动物实验室完成。选择体重(190±10)g清洁级Wistar雄性大鼠53只,按随机数字表法分为4组,正常对照组11只,其余模型组、加味关节康治疗组、雷公藤片治疗组,每组各14只。大鼠左后足垫皮内注射完全弗氏佐剂 CFA0.1ml免疫法,制备佐剂性关节炎(AA)模型。造模后2d大鼠左后足相继出现不同程度的肿胀,造模后14d出现继发关节炎症状(非致炎侧及双前肢的关节红肿),造模成功,模型组与治疗组每组选11只造模成功大鼠,即正常组11只、模型组11只、加味关节康治疗组11只、雷公藤片治疗组11只。造模后20d,加味关节康治疗组:灌胃加味关节康汤剂8.37g/(kg·d);雷公藤片治疗组:灌胃雷公藤片混悬液4.5 mg/(kg·d);正常对照组和模型组每日灌胃等量自来水。①造模前测一次大鼠左后足趾肿胀度,造模后17d测一次大鼠左后足趾肿胀度以及观察大鼠四肢关节病变程度。②关节炎指数评定采用关节炎评分法(0~4分),分数越高,症状越重。③于用药后1周、2周、3周测一次大鼠左后足趾肿胀度及关节炎指数评分。④于用药后3周测定血清白介素-4、白介素-8、白介素-10、白介素-12、肿瘤坏死因子-α和干扰素-γ水平。⑤于用药后3周观察大鼠滑膜组织和软骨组织病理形态学变化。⑥组间比较采用方差分析。  结果:实验过程中模型组、加味关节康治疗组及雷公藤片治疗组分别死亡1只,因此最终纳入正常组11只、模型组10只、加味关节康治疗组10只、雷公藤片治疗组10只,供41只,进入结果分析。①致炎后17d及用药后1周、2周、3周,模型组及两组治疗组大鼠左后足关节肿胀度均大于正常组,差异有显著性意义。用药后2周和3周两组治疗组大鼠左后足关节肿胀度均小于模型组,差异均有显著性意义。②用药后2周、3周,加味关节康治疗组、雷公藤片治疗组大鼠关节炎指数低于模型组,差异有显著性意义。③用药后3周模型组大鼠血清 TNF-α、IFN-γ、IL-8、IL-12水平明显高于正常组,差异有显著性意义,模型组大鼠血清 IL-4水平低于正常组,差异有显著性意义,血清IL-10水平略低于正常组,但差异无显著性意义;用药后3周各治疗组大鼠血清TNF-α、IFN-γ、白介素-8、白介素-12水平均低于模型组,差异有显著性意义;血清白介素-4、白介素-10水平均高于模型组,差异有显著性意义。④用药后3周模型组滑膜组织细胞增生和炎症细胞浸润较明显;各治疗组与正常组比较仍有滑膜组织增生和炎症细胞浸润,与模型组比较滑膜组织增生程度明显减轻,而炎症细胞浸润程度稍轻。  结论:加味关节康治疗对佐剂性关节炎大鼠相关前炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ、白介素-8、白介素-12有明显下调作用,并且上调了抗炎因子白介素-4、白介素-10的水平,减轻滑膜增生程度,改善关节肿胀,从而控制类风湿性关节炎的病情发展,疗效肯定。
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