组织工程用大孔径丝素基超细复合纤维膜的制备及性能研究

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采用静电纺丝技术纺得的纤维膜可用作组织工程支架。纤维膜需要具有合适细胞尺寸的孔结构、高孔隙率以及好的力学性能,这是其作为细胞粘附和增殖的组织工程支架的前提。但静电纺丝纺得的纤维支架由于其致密排列的纤维和过小的孔径及小的孔隙率,限制了细胞在纤维支架内的生长。本文通过静电纺丝技术,结合材料舍弃法、超声处理法及微米-纳米堆砌法制备出不同孔径大小的丝素蛋白基纤维支架。通过静电纺丝技术纺得聚乳酸/丝素蛋白(PLA/SF)复合纳米纤维膜,对其进行水蒸汽处理。水蒸汽处理后,PLA/SF复合纳米纤维间未发生明显的粘连及溶胀现象,组分SF的构象主要为β-折叠结构。采用材料舍弃法,聚环氧乙烷(PEO)作为舍弃材料,通过对喷静电纺丝技术纺得PEO-PLA/SF复合纳米纤维膜。对其进行水蒸汽处理2h、去离子水中浸泡15h以完全洗除PEO纤维,通过改变纤维膜中PEO纤维的含量,以期制备具有不同孔径大小的PLA/SF复合纳米纤维膜。研究表明,随着PEO纤维含量的增加,处理后的PLA/SF复合纳米纤维膜的孔径增大,孔隙率增大;纤维膜的断裂强度和断裂伸长率均下降。PLA/SF纤维支架对细胞无毒性,小鼠胚胎成纤维细胞(NIH-3T3细胞)可以很好的在PLA/SF纤维支架上粘附、增殖;大孔径、高孔隙率的PLA/SF纤维支架更有利于细胞的生长。通过静电纺丝技术纺得PLA/SF复合纳米纤维膜,对其进行20min的甲醇处理。甲醇处理后,PLA/SF复合纳米纤维间发生较明显的溶胀现象,组分SF的构象主要为β-折叠结构。处理后的PLA/SF复合纳米纤维膜的断裂强度有所提高,但其断裂伸长率下降。甲醇处理后,将PLA/SF复合纳米纤维膜浸入20ml去离子水中,在0℃水浴内进行超声处理以期改变纤维膜孔径的大小。结果表明,在处理时间相同时,随着超声功率的增大,PLA/SF复合纳米纤维堆积的越松散,孔径增大;在同一超声功率下,随着超声时间的增加,PLA/SF复合纳米纤维堆积的越松散,孔径增大。超声处理后,纤维膜的厚度增加,呈三维立体结构。NIH-3T3细胞在PLA/SF纤维支架上具有好的生长状况;超声处理后的大孔径、高孔隙率的PLA/SF纤维支架更有利于细胞的生长,通过微米(m)-纳米(n)堆砌法以期改变纤维膜孔径的大小。通过对喷静电纺丝技术纺得聚己内酯(n)-聚己内酯/丝素蛋白(n)(PCL(n)-PCL/SF(n))复合纳米纤维膜、不同转速下的PCL(m)-PCL/SF(n)复合微-纳米纤维膜。结果表明,在相同转速的条件下,PCL(m)-PCL/SF(n)复合微-纳米纤维膜的孔径、孔隙率明显大于PCL(n)-PCL/SF(n)复合纳米纤维膜的,PCL(m)-PCL/SF(n)复合微-纳米纤维膜具有更高的断裂伸长率,但其断裂强度低于PCL(n)-PCL/SF(n)复合纳米纤维膜的;随着滚筒转速的减小,微米-纳米纤维堆砌的越松散,PCL(m)-PCL/SF(n)复合微-纳米纤维膜孔径增大,断裂伸长率增加,断裂强度减小。PCL-PCL/SF纤维支架对细胞均无毒性,NIH-3T3细胞可以很好的在PCL-PCL/SF纤维支架上增殖生长;NIH-3T3细胞在大孔径、高孔隙率的PCL(m)-PCL/SF(n)纤维支架上具有更好的生长状态,大孔径、高孔隙率的PCL(m)-PCL/SF(n)纤维支架更有利于细胞的生长,更适于作为组织工程支架应用于组织工程。
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