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中国在柿栽培面积和产量上均处于世界第一位,柿具有较高经济价值,其有效成分、生物活性研究受到广泛关注。本文开展柿木皮单宁的提取纯化及抗氧化活性研究,研究结果对柿树的综合利用具有重要理论意义和应用前景。主要研究内容和取得成果如下:(1)建立了Folin-Ciocalteu法测定柿木皮总酚的定量分析方法和香草醛-硫酸法测定柿木皮单宁的定量分析方法。Folin-Ciocalteu法测定柿木皮总酚的方法是:以没食子酸溶液为标准品,经福林酚和碳酸钠显色后在760nm下测定吸光值,并绘制标准曲线,吸光值与没食子酸质量呈良好线性关系,线性方程为:A=12.290m+0.0336(R2=0.9998),精密度、重现性和加标回收试验结果分别为RSD=0.35%, RSD=0.35%,RSD=0.23%(平均加标回收率为100.47%)。香草醛-硫酸法测定柿木皮单宁的方法是:以儿茶素为标准品,经香草醛和浓硫酸显色后在500nm下测定吸光值,绘制标准曲线,吸光值与儿茶素质量呈良好线性关系,线性方程为:A=6.1851m+0.0066(R2=0.9995)。精密度、重现性和加标回收试验结果分别为RSD=0.35%,RSD=0.22%, RSD=0.23%(平均加标回收率为96.48%)。(2)超声波辅助法从柿木皮中提取单宁的工艺优化。通过单因素和正交试验优化提取工艺,影响单宁提取得率因素的大小顺序为:乙醇体积分数>提取功率>提取温度>提取时间。柿木皮中单宁的最佳提取工艺条件为超声波功率360W、提取温度70。C、乙醇体积分数40%、提取时间50min,优化条件下单宁得率为5.6%。(3)筛选出最佳大孔树脂及其纯化条件:HPD500型树脂为最佳吸附树脂,其纯化柿木皮单宁的最佳工艺参数是:上柱流速1.5mL·min-1,上样质量浓度1.2mg·g-1;洗脱流速为1.5mL·min-1,洗脱剂乙醇体积分数为60%。采用溶剂萃取法和大孔树脂吸附法纯化柿木皮单宁粗提物(组分A)纯度5.6%,获得八个不同纯度单宁组分:用乙酸乙酯萃取粗提物得到组分B(纯度11.5%),用大孔树脂纯化粗提物得到组分C(纯度19.4%),用大孔树脂纯化乙酸乙酯萃余物得到组分D(纯度47.4%),用大孔树脂纯化组分B得到组分E(纯度53.3%),用石油醚萃取组分C得到组分F(纯度53.68%),用乙酸乙酯萃取石油醚萃余物得到组分G(纯度55.32%),用正丁醇萃取乙酸乙酯萃余物得到组分H(纯度62.33%)和水相残留组分I(纯度68.66%)。(4)分别考察了组分A、B、C、D、E等不同纯度的柿木皮单宁对DPPH·和-OH的清除作用,结果表明:各柿木皮单宁物质在质量浓度为1mg·mL-1时对DPPH·有最大清除率,清除率分别为69.07%、80.19%、92.96%、94.02%、94.05%;清除DPPH·自由基的ICso值分别为0.68、0.52、O.13、O.12、0.11mg·mL-1;各试样对DPPH·的清除能力依次增强;各柿木皮单宁物质在质量浓度为0.9mg·mL-1时对·OH有最大清除率,清除率分别为43.04%、73.99%、83.OO%、94.68%、96.23%。(5)用过氧化值(peroxide number, POV)和丙二醛(malonaldehyde, MDA)吸光值分析方法考察了组分A、C、F、G、H、I等6个组分的油脂抗氧化性能,并探讨了组分A、C、H、I等4个组分分别与维生素C(Vc)的协同作用,得到如下结论:6种组分都对油脂有一定的抗氧化性能,极性大的溶剂萃取物具有更好的抗油脂氧化性能;当组分A添加量为0.08%,组分C添加量为0.04%时,有较强抗油脂氧化活性,但与Vc均没有协同增效作用;当组分H添加量为0.04%时,有很好抗氧化作用,其抗氧化效果优于Vc并且和Vc组合有明显协同增效作用;当组分I添加量为0.08%时,有较强的抗油脂氧化活性,与Vc无协同增效作用。