药物与蛋白、DNA相互作用机制的研究

来源 :长春师范大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:luo_yu
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运用荧光光谱法和紫外-可见吸收光谱法在生理条件下(pH=7.4)研究了水飞蓟素与牛血清白蛋白(BSA)、溶菌酶(LYS)的相互作用。实验结果表明水飞蓟素对BSA和LYS内源荧光的猝灭均是静态猝灭。在291K时,水飞蓟素与BSA和LYS的结合常数KA的值分别为4.20×104和4.71×104L mol-1。根据热力学方程推断出疏水作用力和静电引力是水飞蓟素与BSA、 LYS结合的主要作用力。另外考查了在291K时,Cu2+,Mg2+,Ca2+,Fe2+和Fe3+对水飞蓟素与BSA、LYS相互作用的影响。根据非辐射能量转移理论确定了水飞蓟素-BSA和水飞蓟素-LYS间的结合距离分别为3.36和2.71nm。同步荧光光谱表明,水飞蓟素改变了BSA和LYS的构象。应用荧光光谱法和紫外-可见吸收光谱法研究盐酸克仑特罗与牛血清白蛋白(BSA)或溶菌酶(LYS)的相互作用。盐酸克仑特罗对BSA和LYS的内源荧光猝灭都是静态猝灭过程。BSA和LYS与盐酸克伦特罗的结合常数随温度升高而下降。ΔH和ΔS的值表明,盐酸克伦特罗-BSA和盐酸克伦特罗-LYS化合物结合时,疏水作用力和静电引力发挥了重要作用。当体系中存在Fe2+,Fe3+,Cu2+,Mg2+,Ca2+和Zn2+金属离子时,对盐酸克伦特罗-BSA或盐酸克伦特罗-LYS的结合常数没有显著影响。对于盐酸克伦特罗-BSA和克伦特罗-LYS体系,供体和受体之间的距离分别为2.61和2.19nm。此外,同步荧光光谱法探讨了盐酸克仑特罗对这两种蛋白构象的影响。利用荧光光谱法和紫外-可见吸收光谱法研究了Meso-四(对-羟基苯基)卟啉(THPP)与牛血清白蛋白(BSA)和溶菌酶(LYS)的结合。结果表明THPP对BSA和LYS的猝灭均是动态猝灭。在291K,THPP-BSA和THPP-LYS的KA结合常数分别为8.85×104和4.94×104L mol-1。 ΔH,ΔG和ΔS的值表明主要作用力是疏水作用力。给体BSA或LYS和受体THPP之间的距离分别为3.69和3.35nm。同步荧光光谱表明,THPP的加入使Trp残基的周围的极性减弱,疏水性增强。利用荧光光谱法,紫外吸收光谱法,粘度测量实验和DNA熔解实验研究了沙丁胺醇和脱氧核糖核酸(DNA)的相互作用。计算了不同温度下结合常数和结合位点数。Stern-Volmer曲线表明,DNA对沙丁胺醇的猝灭是一个静态猝灭过程。运用了多种分析方法探讨了DNA与沙丁胺醇的结合模式,结果如下:随着沙丁胺醇的加入DNA的紫外吸收光谱发生了增色效应;沙丁胺醇的加入对DNA的熔解温度没有明显影响;当离子强度增加时,沙丁胺醇-DNA体系的荧光强度降低;沙丁胺醇的存在并没有改变DNA的相对粘度;沙丁胺醇与双链DNA(dsDNA)的结合常数远高于它与单链DNA(ssDNA)的结合常数。所有这些结果表明,沙丁胺醇与DNA的结合方式应该是沟区结合。热力学参数表明,氢键和范德华力在沙丁胺醇与DNA结合中发挥了重要作用。根据F rster能量转移理论,受体和供体的结合之间的距离为3.70nm。
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