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目的:探讨小鼠双侧杏仁核去5-HT支配后,p-ERK1/2、FosB/△FosB和NF-κB蛋白在前脑边缘系统的表达变化,为深入研究杏仁核5-HT递质系统在抑郁症中的功能、前脑边缘系统各脑区在抑郁状态下的功能和联系提供实验研究资料。
方法:雄性昆明小鼠,体重25~30g,随机分为1h和14d两个时间点组,每个时间点组再分对照组和实验组,应用立体定位注射技术向小鼠双侧杏仁核注射5,7-双羟色胺(5,7-DHT)2μl(5μg/μ1),1h组术后1h取脑,14d组在13d进行检测抑郁行为的悬尾实验和强迫游泳实验,14d取脑;应用免疫印迹技术检测定位注射1h和14d前脑边缘系统的杏仁核、海马、隔区、前额皮质、扣带皮质、顶皮质等脑区p-ERK1/2和NF-κB蛋白表达情况;应用冰冻切片的免疫组织化学染色检测小鼠前脑内FosB/△FosB蛋白的表达。
结果:①行为学检测:实验组小鼠强迫游泳无动时间(P<0.05)和悬尾无动时间(P<0.01)较对照组延长;②Westernblot:杏仁核p-ERK1/2在1h对照组和实验组、14d实验组表达未见差异(P>0.05),但均高于14d对照组(P<0.05),NF-κB表达在两个实验组均高于相应对照组(P<0.01);扣带皮质p-ERK1/2表达趋势与杏仁核相同(P<0.05),NF-κB表达在14d实验组低于其他三组(P<0.05):隔区p-ERK1/2和NF-κB表达在14d实验组高于其他三组(P<0.05);海马p-ERK1/2(P<0.01)和NF-κB(P<0.05)表达在14d实验组低于其他三组;前额皮质和顶皮质表达趋势相同,p-ERK1/2在14d实验组高于其他三组(P<0.01),NF-κB在1h实验组高于相应对照组而在14d实验组低于相应对照组(P<0.05);⑨免疫组织化学染色:杏仁核的FosB/△FosB阳性神经元在实验组均多于对照组(P<0.01),实验组间和对照组间未见差异(P>0.05),隔区和前额皮质在14d实验组阳性神经元数量多于其他三组(P<0.01),其他三组间未见差异(P>0.05),海马在14d实验组阳性神经元表达显著少于其他三组(P<0.01),其他三组末见差异(P>0.05)。
结论:①双侧杏仁核去5-HT支配可致小鼠出现抑郁样表现;②杏仁核神经元可能直接参与了小鼠的抑郁行为表现,其中,NF-κB相关传导通路可能起重要作用,而p-ERK1/2和FosB/△FosB在此过程中的作用更广泛;③扣带皮质的功能变化与杏仁核相似,两个脑区在应激反应和小鼠抑郁样行为过程中联系密切;④隔区神经元也参与了小鼠抑郁行为的产生,其活动增强;相反,海马区神经元活动则明显下降;⑤前颓皮质和顶皮质也参与了杏仁核去5-HT支配小鼠的抑郁行为的产生,两者神经元活动变化相似,则在抑郁状态下,顶皮质与杏仁核-前额皮质间是否存在特殊联系通路还有待进一步验证。