目的:本实验将在前期研究的基础上,进一步研究磁感应热疗(Magnetic induction hyperthermia,MIH)分别联合表柔比星(Epirubicin,EPI)、康莱特注射液对人乳腺癌MCF-7细胞的作用效果。通过对不同浓度磁性微球的体外升温性能和对人乳腺癌MCF-7细胞生物相容性的检测,筛选出最佳磁介质浓度,评估磁感应热疗磁介质的安全性和可行性;磁感应热疗分别联合表柔比星、康莱特注射液干预MCF-7细胞,明确联合作用对MCF-7细胞活力、细胞周期分布、细胞凋亡率的影响。初步探讨磁感应热疗对MCF-7细胞的增殖影响,及联合药物对乳腺癌治疗的可行性。方法:1.磁性微球体外升温性能测定将各组不同质量浓度的磁性微球分别置于300kHz 40Gs交变磁场设备中,用温度记录系统和温度显示仪测定并记录磁性微球在体外的升温性能与时间的关系,并描绘升温曲线。2.磁性微球对MCF-7细胞生物相容性检测将处于对数生长期的MCF-7细胞与各组磁性微球浸提液培养24h、48h、72h,对应时间用MTT法检测细胞的增殖活力,观察细胞形态变化。3.磁感应热疗联合表柔比星对MCF-7细胞的作用用MTT法检测不同浓度表柔比星对MCF-7细胞的抑制率,选出表柔比星的工作浓度。实验设置:对照组、磁感应热疗组、表柔比星组和联合组,各组分别采取相应的干预措施,磁感应组和联合组置于300kHz 40Gs交变磁场设备中升温30min后放回培养箱中,继续培养24小时,分别用MTT法、流式细胞仪检测各组细胞增殖率、凋亡率和细胞周期,对比分析磁感应热疗联合表柔比星对MCF-7细胞的作用影响。4.磁感应热疗联合康莱特注射液对MCF-7细胞的作用用MTT法检测不同浓度康莱特注射液对MCF-7细胞的抑制率,选出康莱特注射液的工作浓度。实验设置:对照组、磁感应热疗组、康莱特组和联合组,各组分别采取相应的干预措施,磁感应组和联合组置于300kHz 40Gs交变磁场设备中升温30min后放回培养箱中,继续培养24小时,分别用MTT法、流式细胞仪检测各组细胞增殖率、凋亡率和细胞周期,对比分析磁感应热疗联合康莱特注射液对MCF-7细胞的作用影响。结果:1.本实验选用的磁性微球,升温性能优良,对MCF-7细胞毒性≤1级,生物相容性良好。因42℃-45℃高温能杀死肿瘤细胞,且正常细胞几乎没有损伤,故根据升温曲线,本实验选用浓度为65mg/ml的磁性微球作为交变磁场感应升温的磁介质。2.在300kHz 40Gs交变磁场设备中,65mg/ml磁性微球作用于MCF-7细胞升温30min后,细胞的相对增殖率降至(84.18±2.41)%,(P<0.01);磁感应热疗促进细胞的凋亡,早凋+晚凋细胞比例为(19.00±4.62)%,(P<0.05),将MCF-7细胞阻滞于G2/M期。3.本实验中表柔比星工作浓度为13.14 μmol/l,磁感应热疗与表柔比星联合作用MCF-7细胞后,细胞增殖率降至(38.51 ± 1.26)%,(P<0.05);联合组可促进MCF-7细胞凋亡的进程,早凋和晚凋细胞均明显增多,早凋+晚凋细胞比例为(61.47±2.12)%,(P<0.01);联合组对MCF-7细胞周期有阻滞作用,可将细胞阻滞于G0/G1、G2/M期。4.本实验中康莱特注射液工作浓度为400 μ g/ml,磁感应热疗与康莱特注射液联合作用MCF-7细胞后,细胞增殖率降至(55.88±2.87)%,(P<0.01);联合组可促进MCF-7细胞凋亡的进程,早凋+晚凋细胞比例为(40.60±3.88)%,(P<0.01);联合组对MCF-7细胞周期影响较小。结论:本实验所选用的磁性微球磁介质为微米级,升温性能优良,在体外细胞实验中被证明对MCF-7细胞是安全可行的。磁感应热疗可抑制MCF-7细胞的增殖,促进细胞凋亡,并可将MCF-7细胞周期轻度阻滞在G2/M期;磁感应热疗对表柔比星具有明显协同增敏抗MCF-7细胞增殖的作用,可显著促进表柔比星对MCF-7细胞的凋亡作用,并对MCF-7细胞周期有阻滞作用,把细胞阻滞在G0/G1期、G2/M期;磁感应热疗可增加康莱特注射液对MCF-7细胞增殖抑制作用,促进细胞的凋亡进程,但对康莱特注射液的细胞周期阻滞作用无明显改变。本体外实验证明磁感应热疗新技术联合药物对乳腺癌细胞治疗的有效性和可行性,这为临床治疗乳腺癌开拓了新思路。