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目的:梗阻性黄疸(obstructive jaundice,OJ)因胆汁排入肠腔受阻,内毒素释放增多,使肠上皮细胞增殖、凋亡之间失衡,肠屏障功能受损。肠黏液层是抵御有害物质入侵的首要屏障,主要由黏蛋白-2(mucin2,MUC2)组成。既往我们的研究已经证实OJ患者及大鼠肠黏液屏障存在损伤,肠道MUC2蛋白分泌减少,而其在胆汁内、外引流术后分泌增加,且外引流术劣于内引流术。因此我们推测胆汁酸可促进肠上皮细胞MUC2蛋白分泌,维持肠黏液屏障功能。而鹅去氧胆酸(Chenodeoxycholic Acid,CDCA)属于初级胆汁酸,其对MUC2的刺激作用最强。研究表明Notch信号通路对肠上皮细胞增殖和分化至关重要,其活化可促进肠上皮细胞增殖,恢复肠屏障功能。因此我们以Notch为切入点,观察CDCA对Caco-2细胞黏液损伤模型MUC2蛋白及基因表达的影响,并探讨其作用机制。方法:通过脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导,在体外构建人肠上皮Caco-2细胞黏液损伤模型,应用Western Blot及Real-Time PCR检测不同浓度CDCA对Caco-2细胞黏液损伤模型MUC2和Notch蛋白及基因表达的影响。并应用DAPT(Notch1特异性抑制剂)反证其作用。结果:1.LPS使MUC2蛋白及基因表达降低,介导Caco-2细胞黏液屏障损伤;Western Blot结果示,LPS组MUC2蛋白表达较DMSO组减低(MUC2/β-actin 0.24±0.06,0.39±0.04,P<0.01),差异有统计学意义。Real-Time PCR结果与其一致。2.不同浓度CDCA使MUC2蛋白及基因表达增高,保护LPS介导的Caco-2细胞黏液屏障损伤;Western Blot结果示,50μM、100μM、150μM CDCA组与LPS组相比,MUC2蛋白表达明显增高(MUC2/β-actin 0.87±0.07,1.06±0.06,1.36±0.06,,0.24±0.06,P<0.01),且150μM CDCA组最高(P<0.01)。Real-Time PCR结果与其一致。3.CDCA通过Notch信号通路保护Caco-2细胞黏液屏障损伤。Western Blot结果示,DAPT(20μM)组较CDCA组(150μM)Notch1蛋白表达降低(Notch1/β-actin 0.14±0.01,1.35±0.05,P<0.05),伴随MUC2蛋白表达降低(MUC2/β-actin 0.28±0.03,1.36±0.06,P<0.05),且与LPS组无统计学差异(P>0.05)。Real-Time PCR结果与其一致。结论:1.LPS使MUC2蛋白及基因表达降低,介导Caco-2细胞黏液屏障损伤。2.不同浓度CDCA促进MUC2蛋白及基因表达,保护LPS介导的Caco-2细胞黏液屏障损伤,并且呈剂量依赖。3.CDCA通过上调Notch信号通路,保护Caco-2细胞黏液屏障损伤。