Prx-1抑制小鼠矽肺纤维化的作用及其机制

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目的硫氧还蛋白过氧化物酶1(peroxiredoxin-1,Prx-1)是一种新型过氧化物酶,其在矽肺纤维化中的作用并不清楚。本研究将探讨Prx-1是否可通过降低氧化应激损伤并抑制丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号转导通路,发挥抗矽肺纤维化作用。方法将40只8周龄雄性C57BL/6的小鼠随机分为4组(每组10只):对照组、矽肺组、转染对照组和Prx1转染组。对照组给予生理盐水,矽肺组经支气管灌注SiO2悬液(50mg/ml,200ul/只),转染对照组与Prx-1慢病毒转染组经支气管灌注二氧化硅悬液+空载体慢病毒或Prx-1慢病毒(1x107TU/只)。模型制备12周末,小鼠麻醉后行体循环灌注,取左肺固定包埋切片,右肺-80℃冻存。HE染色观察肺组织病理形态。免疫组织化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及Prx-1;免疫荧光法检测8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达。免疫印迹法检测Ⅰ型及Ⅲ型胶原、细胞外信号调节激酶(Extracellular Signal Regulated Kinase,ERK1/2)、p38、氨基末端激酶(c-jun N-terminal kinase,JNK)的表达水平。结果1 HE染色显示:对照组肺泡结构正常,矽肺组和转染对照组出现典型的矽结节和间质纤维化,与转染对照组比较,Prx-1转染组矽肺结节面积明显减少。2免疫组化结果显示:与对照组比较,矽肺组和转染对照组α-SMA和Prx-1阳性染色评分显著升高;而与转染对照组相比,Prx-1转染组α-SMA阳性染色评分下降,Prx-1阳性染色评分升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。3免疫荧光结果显示:与对照组相比,矽肺组和转染对照组8-OHd G荧光强度增强。与转染对照组相比,Prx-1转染组荧光减弱,差异具有统计学意义(P<0.05)。4免疫印迹结果显示:与对照组相比,矽肺组和转染对照组p-ERK1/2、p-P38、p-JNK、Ⅰ型及Ⅲ型胶原表达上调,而与转染对照组比较,Prx-1转染组p-ERK1/2、p-P38、p-JNK、Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白表达水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论Prx-1可抑制SiO2诱导的肺组织纤维化,这种作用与降低氧化应激并抑制MAPK信号转导通路活化,减少肌成纤维细胞分化有关。
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