稻瘟病菌中受MoSom1调控的部分基因的敲除及功能分析

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先前的研究鉴定了一个作用于cAMP-PKA信号途径下游,影响稻瘟病菌形态分化和致病性的重要转录调控因子:MoSom1。我们对突变体△mosom1进行了表达谱测序分析,结果发现MoSOM1缺失导致稻瘟病菌很多基因的表达发生明显变化,本实验从中挑选4个表达差异显著的基因进行敲除及功能分析,以期发现与转录因子MoSom1相关的新的致病基因。同时,我们通过生物信息学分析,在稻瘟病菌基因组中选取2个含锌指结构的转录因子和1个含ARID DNA-domain的假定蛋白一并进行敲除和功能鉴定,以期发现新的调控稻瘟病菌重要生物学功能的基因。但通过对这些基因进行敲除实验及表型分析,我们发现这些基因的缺失不影响稻瘟病菌形态发育和致病性。   我们的另一个研究发现两个编码亚甲基四氢叶酸还原酶MTHFR的同源基因MoMET13和MoMET12,已有的研究结果表明这两个基因参与甲硫氨酸代谢途径的叶酸循环,MoMET13基因缺失后稻瘟病菌不能在甲硫氨酸营养缺陷条件下生长并丧失对寄主水稻的致病性。为了研究这两个基因的缺失对稻瘟病菌甲硫氨酸途径中其它相关基因的影响,本研究通过qRT-PCR对该途径中的相关基因在突变体和野生型菌株中的表达进行了差异分析,结果发现这些基因的表达明显受到Mo MET13和MoMET12基因缺失的影响。另为了探究亚甲基四氢叶酸还原酶MoMet13在真菌中是否具有功能保守性,我们用赤霉(F.graminearum)中与MoMET13同源的基因FGSG_09572互补稻瘟病菌MoMET13基因的缺失突变体,但到目前为止我们尚未获得能恢复该突变体表型的转化子。
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