生脉注射液质量控制研究

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生脉注射液是由红参、麦冬、五味子经提取后制成的灭菌水溶液,是国家中药保护品种。临床上广泛用于心源性休克、心肌梗塞、感染性休克等症。根据国家药监局下发的《关于做好中药注射剂安全性再评价工作的通知》,为了控制生脉注射液的质量,保证临床用药的安全性与有效性,本研究运用各种分析方法,对生脉注射液及其原材料、中间体进行质量控制研究。本文首先采用苯酚浓硫酸显色法,通过不同的前处理方法对生脉注射液及其中间体总固体中总糖进行含量测定,并进行方法学验证,结果表明糖类成分占总固体的50%以上,且个批次生脉注射液及其中间体含糖量差异较大;采用蒸发光检测器液相色谱法,Prevail carbohydrate ES色谱柱对生脉注射液及其中间体中单糖或二糖进行定量分析,测定结果与紫外显色法基本一致,同时验证了紫外显色法测定总糖含量的准确性;采用香草醛-冰醋酸显色大孔树脂柱洗脱的方法测定红参中间体及生脉注射液中总皂苷的含量,并建立了HPLC测定生脉注射液中单体皂苷的含量测定方法用于指标性成分的含量测定,采用氨基酸分析仪测定生脉注射液及其中间体中游离氨基酸的含量;采用石油醚对五味子中间体先进行萃取,得到总木脂素后在251nm下直接测定紫外的方法,对五味子中间体总木脂素进行含量测定;采用Waters Xbridge Amide色谱柱,乙腈磷酸盐缓冲液为流动相测定五味子中间体中有机酸类成分的含量。建立了红参药材及红参中间体指纹图谱分析方法,为其质量评价提供依据。采用Sharpsil-TC18色谱柱(4.6 mmⅹ250 mm,5μm);以乙腈-水梯度洗脱;柱温为30℃;流速为1.0 ml/min;检测波长为203nm。红参药材以人参皂苷Rb1为参照峰,建立10批红参的对照指纹图谱,识别出24个共有峰,其相似度均大于0.940。通过质谱推断、对照品比对确证了其中11个共有峰;红参中间体以人参皂苷Rh4为参照峰,建立10批红参中间体的对照指纹图谱,识别18个共有峰,相似度大于0.935。
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