粉尘螨抗原免疫治疗小鼠结肠癌的初步研究

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结肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率居高不下,全球每年有120万例新增结肠癌患者,目前对结肠癌的治疗仍然以手术、放疗和化疗为主。我们研究发现结肠癌患者中Treg细胞比例较正常人高,而在过敏性疾病患者中Treg细胞比例较正常人低。本研究使用粉尘螨粗蛋白和Der f2重组蛋白用于治疗小鼠结肠癌模型以及对治疗效果进行一系列检测。方法:首先制备和鉴定粉尘螨粗蛋白和表达纯化Der f2重组蛋白,摸索建立合适的小鼠结肠癌模型;制定免疫治疗方案后进行建模及治疗,监测小鼠肿瘤生长状况;处死小鼠后,对小鼠肿瘤进行称重。用流式细胞的方法检测CD8+T细胞比例及CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例;用荧光定量PCR的方法检测Foxp3转录水平;分别用Western-blot印迹杂交和免疫组化检测小鼠肿瘤组织内Foxp3蛋白水平。结果:摸索和建立了合适的小鼠结肠癌模型;成功制备和鉴定了粉尘螨粗蛋白以及表达纯化的Der f2重组蛋白,并用于小鼠结肠癌模型的治疗;经过治疗后,治疗组小鼠肿瘤生长速度均减缓,其肿瘤重量均低于未治疗组;经流式细胞检测,治疗组小鼠体内CD8+T细胞比例上升,CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例下降,与未治疗组相比,治疗组小鼠体内Foxp3转录水平均明显减低;Western-blot和免疫组化检测结果显示治疗组小鼠肿瘤中Foxp3蛋白水平均降低。结论:本实验结果表明粉尘螨粗蛋白和Der f2重组蛋白均能有效治疗小鼠结肠癌模型,但其分子机理有待进一步实验证明。用粉尘螨抗原治疗结肠癌有望成为癌症的免疫治疗新方法。
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