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细胞凋亡(Apoptosis)是一个主动、高度有序且由基因决定的自动使细胞生命终止的过程,在保证多细胞生物健康发育的过程中扮演者重要的角色。它对生物体进化、维持细胞内环境稳定和维持组织中细胞数量起着关键性作用。在生物免疫学领域,细胞凋亡的过程有同一系列的蛋白家族的参与。其中,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶家族(Cysteine aspartic acid specific protease,Caspases)是可以直接触发细胞凋亡被解体的蛋白酶体系,并在细胞凋亡的进程中发挥着重要的作用。本研究主要对中华乌塘鳢的Bscasp-1、Bscasp-7、Bscasp-8和Bscasp-9基因进行了序列鉴定、进化分析和表达分析。其中,Bscasp-1,Bscasp-7,Bscasp-8和Bscasp-9基因蛋白序列分别编码390bp,314bp,478bp和435bp个氨基酸。Bscasp-1和Bscasp-9基因包含三个结构域,一个caspase募集结构域(CARD)和CASc结构域,其中CASc结构域包含一个P20大亚基结构域和一个P10小亚基结构域。Bscasp-8基因具有两个死亡效应域(Death Effector Domain,DED)、一个P20大亚基结构域和一个P10小亚基结构域。Bscasp-7基因只有一个CASc结构域。Bscasp-1基因的P20结构域上发现了一个半胱氨酸活性位点(Cys)和保守的五肽序列QACRG。Bscasp-7基因包含一个组氨酸活性位点(His)、一个半胱氨酸活性位点和保守的五肽序列QACRG。Bscasp-8基因有一个半胱氨酸活性位点和保守的五肽序列QACQG。Bscasp-9基因有一个组氨酸活性位点、一个半胱氨酸活性位点和保守的五肽序列QACGG。采用RT-PCR技术检测Bscasp-1、Bscasp-7、Bscasp-8和Bscasp-9基因在十个组织中的表达情况以及Bscasp-1、Bscasp-7、Bscasp-8和Bscasp-9基因在副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)感染和病毒拟似物poly(I:C)刺激后的表达水平变化,推测caspase-1、caspase-7、caspase-8和caspase-9基因在中华乌塘鳢抗细菌病毒免疫中的作用。研究结果显示:Bscasp-1、Bscasp-7、Bscasp-8和Bscasp-9基因在十个正常组织中均有广泛性表达。其中,Bscasp-1、Bscasp-7和Bscasp-8基因在鳃中表达量最高,Bscasp-9基因在肝脏中表达量最高。经副溶血性弧菌感染后,Bscasp-1、Bscasp-7、Bscasp-8和Bscasp-9基因均显著上调。Bscasp-1和Bscasp-7基因在外周血中的表达峰值分别为正常对照组的86倍和161倍。Bscasp-8基因在脾脏中的表达峰值为正常对照组的281倍。而在外周血中Bscasp-9基因的表达峰值仅比对照组高8倍。经poly(I:C)刺激后,Bscasp-1和Bscasp-7基因在头肾中的表达变化最明显,表达峰值分别为对照组的81倍和255倍。此外,Bscasp-8和Bscasp-9基因在外周血和肝脏中的表达峰值分别比对照组高168和18倍。本论文的研究结果表明,中华乌塘鳢caspase-1、caspase-7、caspase-8和caspase-9基因可能参与了细菌和病毒诱导的免疫应答,并首次证明了caspase-1、caspase-7、caspase-8和caspase-9基因对中华乌塘鳢细菌感染或病毒刺激的最佳防御至关重要。