目的：1、HPLC色谱法检测MCF-7细胞来源的硫酸乙酰肝素(heparan sulfate, HS)；2、研究MCF-7细胞来源的HS对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡的调控作用，及对GRP78蛋白和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响，探讨HS体外抗乳腺癌作用的机制。　　方法：1、HS链的提取、纯化及 HPLC分析培养人乳腺上皮癌细胞MDA-MB-231及MCF-7，收集汇合期培养液，DEAE-Sepharose-CL-6B离子交换色谱分析、透析、蛋白含量测定；硫酸软骨素酶（Chondroitinase ABC）化学降解、冷冻干燥，链霉蛋白酶（Pronase）降解硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（heparan sulfate proteoglycan, HSPG）的核心蛋白；或肝素酶Ⅰ（HeparinaseⅠ）化学降解、冷冻干燥，链霉蛋白酶降解硫酸软骨素蛋白聚糖（heparan sulfate proteoglycan, CSPG）的核心蛋白，冷冻干燥备用。收集上述各步提取物，分别于HPLC分析。2、HS链的体外抗乳腺癌实验用不同浓度的MCF-7细胞来源的HS处理MDA-MB-231细胞，倒置显微镜下观察用药前后受试细胞形态的变化；噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率；流式细胞仪(flow cytometer，FCM)检测细胞凋亡率；蛋白质印迹(western blotting)法检测GRP78和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。　　结果：1、HPLC分析证实经酶解后最终所得细胞合成物为HS链。2、HS链可致MDA-MB-231细胞变圆、漂浮、空泡、轮廓模糊，大剂量组（HS1000μg/ml）出现了大量的细胞碎片。3、不同浓度的HS均能显著抑制乳腺癌细胞的生长和增殖（P﹤0.01），大剂量组HS1000μg/ml的抑制作用最强，作用72h后，最大抑制率为79.08％。4、HS可诱导 MDA-MB-231细胞发生凋亡。且随着 HS浓度的提高，凋亡率明显增高(P<0.01)。250μg/ml、500μg/ml、1000μg/ml的HS作用24h后，细胞凋亡率依次为8.35%、16.06%、24.72%。5、HS抑制MDA-MB-231细胞GRP78的合成，下调GRP78的表达，且药物浓度越大,抑制作用越明显,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。6、HS可下调MDA-MB-231细胞的Bcl-2蛋白的表达（P<0.05）,上调Bax蛋白的表达（P<0.05），并且药物浓度越大,作用效果越明显。与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。　　结论：1、证明本实验所采用的酶解法和色谱分离法能有效分离纯化HS链；　　2、HS可诱导乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡，抑制其生长和增殖；　　3、HS可抑制乳腺癌细胞 MDA-MB-231的GRP78的表达，同时下调Bcl-2、上调Bax的表达；　　4、HS抗乳腺癌的作用与抑制UPR中GRP78的合成有关。