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采用共振瑞利散射(RRS)、倍频散射(FDS)、二级散射(SOS)、荧光光谱和吸收光谱等方法研究了硫酸软骨素与某些阳离子表面活性剂或碱性染料的相互作用,发展和建立了某些分子光谱技术测定硫酸软骨素的简便、快速、高灵敏的新方法,也扩展了RRS、FDS、SOS的应用范围。本文的主要研究内容及取得的研究成果如下:一.氯化十六烷基二甲基苄铵共振瑞利散射法测定硫酸软骨素钠在pH为6.50的Britton-Robinson缓冲介质中,氯化十六烷基二甲基苄铵、硫酸软骨素钠(CS)单独存在时RRS强度较弱,两者形成离子缔合物时,RRS强度显著增强,最大RRS波长位于315nm左右。研究了体系的RRS光谱特征、适宜的反应条件、CS浓度与RRS强度的关系,建立了快速、灵敏、准确测定CS的方法。CS浓度在0.10~10.00μg/mL范围内与相对散射强度△I成正比,线性方程为△I=20.08+291.1 C(μg/mL),线性相关系数r=0.9992,检出限(3σ,n=10)为0.045μg/mL,RSD为4.5%。该方法适用于注射液中CS含量的测定。二.甲基紫-硫酸软骨素钠体系的共振瑞利散射光谱特征及其分析应用CS与碱性三苯甲烷类染料甲基紫(MV)在pH 9.37的BR缓冲介质中反应形成离子缔合物,使RRS强度明显增强。以两个较大RRS峰所在波长505 nm和661nm为测定波长,研究了适宜的反应条件、影响因素和CS与RRS强度的关系,建立了一种快速、简便、灵敏的测定CS的方法。该方法的线性范围是0.15~0.90μg/mL,检出限分别为0.019μg/mL(505 nm)和0.043μg/mL(661 nm),应用于注射液中CS的测定,结果满意。三.共振瑞利散射法研究吖啶黄与硫酸软骨素钠的相互作用及其分析应用在pH 7.96的BR缓冲介质中,具有较强荧光的碱性吖啶类染料吖啶黄(AY)主要以1价阳离子HR+型体存在,能与溶液中的CS大阴离子借静电引力和疏水作用力形成离子缔合物,从而导致染料的光吸收减弱、荧光猝灭和RRS增强。研究了AY-CS体系的光谱特征、适宜的反应条件、影响因素和CS浓度与RRS强度的关系,提出了RRS技术测定CS的方法。该方法的线性范围是0.05~1.00μg/mL(300 nm)、0.015~0.10μg/mL(490nm)、0.15~1.50μg/mL(508 nm),对应波长处的检出限分别为0.034、0.008、0.019μg/mL。四.氯化十六烷基二甲基苄铵倍频散射和二级散射新方法测定硫酸软骨素钠用FDS、SOS技术研究了CDBAC、CS在近中性介质中的结合反应。研究发现,CDBAC、CS的结合反应能导致FDS、SOS散射显著增强,在λex/λem为785nm/398 nm(FDS)和240 nm/485 nm(SOS)处出现最大散射峰。FDS的线性范围为0.30~12.00μg/mL,检出限(3σ)为0.10μg/mL;SOS的线性范围为0.30~7.50μg/mL,检出限(3σ)为0.11μg/mL。用FDS法测定了注射液中CS的含量,结果满意。五.十六烷基三甲基溴化铵-硫酸软骨素钠体系的的倍频散射和二级散射光谱研究在pH 7.00的BR缓冲介质中,阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)与CS相互作用形成大的离子缔合物而使FDS、SOS强度显著增强,最大散射峰波长λex/λem为780 nm/395 nm(FDS)和240 nm/485 nm(SOS)。FDS的线性范围:0.40~20.00μg/mL,检出限(3σ)为0.14μg/mL;SOS的线性范围:10.00~24.00μg/mL,检出限(3σ)为0.33μg/mL。FDS比SOS方法更适合测定CS。用FDS技术测定了注射液中CS的含量并进行加标回收实验,结果满意。六.吖啶橙荧光猝灭法测定硫酸软骨素钠。在pH 6.00的BR缓冲介质中,CS与碱性吖啶类荧光染料吖啶橙(AO)反应形成离子缔合物引起荧光猝灭,荧光猝灭峰所在波长是547 nm(λex=502 nm),CS浓度在0.20~1.00μg/mL范围内与荧光猝灭程度成正比,检出限为0.19μg/mL,从而建立了用于测定CS的荧光猝灭法。该方法可用于注射液中CS含量的测定。