肿瘤进展过程中常见的上皮细胞间质转化(epithelial mesenchymal transition，EMT)是一个复杂的逐步发生的现象，它最主要的标志是E-cadherin的缺失。多个转录因子表现出对E-cadherin的转录抑制，包括锌指蛋白Snail、Slug、Twist、ZEB1、ZEB2和E12/E47。研究发现有些转录因子之间可以相互作用，直接激活下游转录因子的启动序列，共同促进肿瘤细胞发生EMT转变。在果蝇体中，Snail通过抑制shotgun（E-cadherin的同源物）调控胚胎发育，Snail家族的羧基末端高度保守，介导序列特异性与含有E-box(CAGGTG)的DNA启动子相互作用，这是其参与EMT的主要结构基础。锌指蛋白类转录因子ZEB家族结构中均包含2个锌指簇和连接这两个锌指簇的可变序列。ZEB1双侧的锌指簇必须同时与包含CACCT(G)或CAGGTG(E盒)序列的DNA结合才能发挥调节靶基因转录的功能。ZEB1可以与E-cadherin编码基因启动子上的E2盒[CACCT(G)]结合，抑制E-cadherin的转录，诱导细胞发生EMT。研究发现在黑色素瘤细胞EMT过程中存在Sulg对ZEB1的直接调节，在人乳腺癌细胞系MCF-7的EMT过程中Snail2可以直接激活Twistl的转录，EMT过程中转录因子之间的相互作用使细胞内信号网络更为复杂。　　 试验首先筛选高表达Snail的细胞系提取总RNA，逆转录合成cDNA后运用PCR技术扩增目的基因Snail。试验中采用TA克隆技术大量扩增目的基因，应用相同限制性内切酶EcoRⅠ和XhoⅠ分别切割pEASY-T1-Snaill和质粒pcDNA3.1使其产生相同的粘性末端，用T4DNA连接酶将目的基因与表达载体连接，待测序结果证实目的基因序列正确后，通过转化大肠杆菌大量抽提质粒pcDNA3.1-Snail。利用阳离子脂质体介导转染pcDNA3.1-Snail，使Snail在A549肺癌细胞中高表达。结果发现倒置显微镜下A549细胞的形态更具间质性状，细胞长梭形，分散存在;划痕试验发现与空白组和对照组相比pcDNA3.1-Snail组细胞愈合速度较快;Western Blotting结果示E-cadherin表达减少，而间质性蛋白N-cadherin，Fibronectin表达上调。为增强试验说服力，我们在被5ng/ml的TGF-β作用48小时诱导为间质状态的肿瘤细胞中感染病毒LV-Snail-RNAi后，发现敲除Snail后，高表达的N-cadherin和Fibronectin表达下调，而上皮性蛋白E-cadherin被逆转上调。说明Snail能促进肿瘤细胞发生EMT转变，而抑制Snail的表达有可能会阻止或减缓肿瘤细胞的侵袭和转移。　　 在研究转录因子Snail和ZEB1的调控关系时，我们发现在A549细胞系中高表达Snail后转录因子ZEB1的表达随之升高，在被TGF-β诱导为间质状态的肿瘤细胞中敲除Snail后，被诱导上调的ZEB1又随之下降。反之，ZEB1并未明显改变Snail的表达情况。初步推测Snail在一定程度上调控ZEB1的表达，在EMT信号通路中可能处在ZEB1的上游。　　 综上所述，转录因子Snail能够促进肿瘤细胞发生EMT转变，并在一定程度上调控转录因子ZEB1的表达，提示抑制Snail有可能会阻止或减缓肿瘤细胞的侵袭和转移，这将为肿瘤的治疗提供新视角。