前言 近视眼是常见的眼病，它的患病率高，是主要致盲眼病之一，尤其是病理性近视可导致中心视力不可逆损失。因此，近视防治已成为全球关注的热点问题。关于近视眼发病机理的研究已有200年的历史，提出过许多假说，但均不能明确阐述及解释近视发生的机制。近年来，人们在视觉基础研究中发现动物在视觉发育期，如果视网膜上不能形成清晰的图像，其眼轴会延长，从而产生轴性近视，创立了形觉剥夺学说。本实验以幼猫为实验动物，应用眼睑缝合的方法制造形觉剥夺性近视的猫眼模型，检测其屈光状态、眼轴长度改变，并观察眼轴增长后幼猫巩膜、视网膜的组织形态学的变化，为探讨近视进展的病理因素打下基础。 实验材料 一、实验动物 选用出生4-5周的健康家猫15只，随机分2组，对照组5只，实验组10只。在实验组中随机将5只幼猫的右眼睑缝合，另外5只幼猫的左眼睑缝合，未缝合眼为自身对照眼。 二、试剂与器材 盐酸氯胺酮注射液、1％阿托品滴眼液、动物实验台、手术器械、检影镜、数显卡尺、美国产Allergan Humphery 853型A／B超机 方 法 l、生后4－5周家猫 O）检测屈光状态。 p）用A超测其眼轴长度。 O）缝合实验组眼睑。 2、生后12一 周家猫（缝合后8周） O）拆除实验组眼睑缝线，检测实验组及对照组屈光状态及眼轴长度。 p）再次缝合实验组眼睑。 3、生后18 一19周朝（缝合后14周） （1）同二的（l）。 p）处死实验组及对照组家猫，摘除眼球，经固定、包埋、染色，光镜下观察后极部视网膜、巩膜病理学改变。 结 果 一、屈光状态及眼轴变化 生后 4－5周幼猫均为远视眼，屈光度平均为十2．52 t 0．40D，眼轴平均长为 11．98 t 0．33nun，左右眼屈光状态及眼轴无明显差异。生后12J 周对照组双眼和实验组对照眼趋于正视，屈光度为十0．51 to·34D，眼轴为 15．16。0．22nun，生后18－19周时表现轻度近视，屈光度为一0．43 f 0．33D，眼轴为16．83＊0．28删。实验组缝合眼表现明显近视，缝合后14周屈光度为一z42。o．33D，眼轴为18．95土0．7，与对照眼有显著差异O＜o．皿1八 二、幼猫眼球壁后极部形态学的改变 在形觉剥夺第14周幼猫后极部眼球壁切片光镜下可见：与对 ·2·照组相比，巩膜厚度变薄，巩膜胶原纤维排列紊乱，纤维走向不一，板层结构不均。视网膜的有核细胞层胞核数减少，神经节细胞的胞体也较对照眼小，胞浆内NISSI体减少或消失，视杆与视锥层水肿，平行排列紊乱，细胞结构破坏。 讨 论 用形觉剥夺的方法制造动物的近视模型是由神经生理学家Wesel和Raviola于1977年首先发现的，人们试图用这一方法探讨近视发生、发展的机制。本研究通过应用形觉剥夺的方法制作猫近视眼动物模型，观察其眼轴长度、屈光状态、后极部眼球壁的组织形态学改变，探讨病理性近视发生机制。 幼猫属脊椎动物，有完整的双眼视，与人类的视觉系统接近。猫眼轴与人眼轴发育过程的阶段性有相似之处。这样经过几个月的观察，就相当于了解人眼几年的眼球变化。因此，本实验选择幼猫作为实验动物。本组幼猫生后4－5周均为远视眼，随着视觉发育，远视度下降，趋于正视。实验组缝合眼表现明显近视，与对照眼有明显差异（P＜o．00厂随着剥夺时间的延长，差异更显著。本实验应用A超诊断方法测量活体猫的眼轴长度，与对离体眼球进行测量的方法相比，便于动态连续观察，具有较高的准确性和可信性。结果表明：生后4至12周眼轴增长最快，12至19周眼轴增长相对较慢，而实验组形觉剥夺后，眼球前后径增长，与对照组比较有显著差异，产生明显的轴性近视。 实验中发现：在形觉剥夺第14周，与对照组相比，可见巩膜厚度变薄，巩膜胶原纤维排列紊乱，纤维走向不一，板层结构不均。近视眼巩膜的改变有人认为是纤维被动拉伸过度所致。另一种观点认为，近视眼巩膜的改变是增生活跃但失代偿的表现。 形觉剥夺导致眼轴增大的机理以往曾做过许多研究，早都证 ·3·实了调控形觉剥夺性近视发生的部位是在眼球局部。形觉剥夺造成视网膜感光细胞外节的延伸，向RPE层施加压力，该压力传送到脉络膜造成脉络膜变薄，大血管闭塞，并还可能继续传送到巩膜，造成巩膜的主动延伸或诱发其生长，主要是通过视网膜来调控巩膜的生长。在实验中发现：剥夺眼视网膜的有核细胞层胞核数减少，神经节细胞的胞体也较对照眼小，胞浆内NISSI体减少或消失，视杆与视锥层水肿，平行排列结构破坏。 研究表明，视网膜局部在形觉剥夺性近视的形成过程中起重要的作用，推测与视网膜上的神经无功能及活性改变有关。近年来研究发现，动物实验性近视视网膜神经递质多巴胺水平降低，而儿茶酚胺类、五羟色胺、血管活