杜仲（Eucommia ulmoides Oliv EUO）又名思仙、思仲、木棉等，在我国南自五岭，北至长城的广阔地区普遍种植，是我国特有的植物资源。杜仲入药已有两千多年的历史，《神农本草经》将其列为“药之上品”，具补中益气，坚筋骨，强志，安胎，久服轻身耐劳之功效。《中药大辞典》和《本草纲目》中载杜仲归经入肝，肾经。杜仲多糖（Eucommia ulmoides Oliv Polysaccharides，EOP）是从杜仲科植物杜仲的干燥树皮中提取出的水溶性糖性成分，明确的组分有Gonda等[2]从杜仲皮中分离的酸性聚多糖杜仲糖A（Eucomman A）和Tomoda等[3]提取的杜仲糖B（Eucomman B）。杜仲糖A是由L-阿拉伯糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸按摩尔比8：6：4：5：8组成；杜仲糖B是近年来发现的杜仲又一活性成分，结构主要为α-1，2-1-鼠李糖-α-1，4-d-半乳糖。 环磷酰胺（Cyclophosphamide，CP）是治疗恶性肿瘤最常用的烷化剂代表药物，具有广谱抗癌作用，其主要毒副作用--骨髓抑制、肝损伤和免疫抑制等一直是困扰临床用药的突出难题。根据中西医结合治疗癌症的原则，如何将两者的“互补”作用扩大为“协同”，是临床肿瘤化疗中一个亟待解决的问题。本课题旨在验证和阐明EOP对传统化疗药物CP致小鼠毒性的保护作用，并初步探讨其作用机制，为杜仲的进一步开发利用提供实验和理论依据。 一、杜仲多糖的提取及其对小鼠S180肉瘤生长的抑制作用 EOP是由杜仲皮经脱脂除色素、水提、Sevag法脱蛋白和醇沉四步制的，经苯酚-硫酸法测其含量为55.2％。以CP为阳性对照药，考察EOP对小鼠S180肉瘤生长的抑制作用及对CP骨髓抑制的影响。结果显示EOP能够抑制S180肉瘤的生长，并能够提升胸腺指数和脾脏指数，增加骨髓有核细胞计数及外周血白细胞计数，拮抗CP引起的外周血白细胞和骨髓有核细胞减少。 二、杜仲多糖对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制等毒性的影响 本实验用CP复制肿瘤化疗药物的毒副作用模型，分析EOP对CP致毒性的保护作用。将实验小鼠平均分为6组，每组12只，生理盐水为阴性对照，EOP采用高、中、低3个剂量组。空白组注射生理盐水，其余均以腹腔注射CP造模。连续注射和ig5天，每天称量小鼠体重，末次给药禁食不禁水12小时后，摘除小鼠眼球取血测MDA、SOD，然后将小鼠处死取胸腺、脾脏和肝脏分别计算其指数，另外取肝脏做成匀浆测GSH、ALT，左大腿股骨测其骨髓DNA含量。结果表明，EOP能有效地拮抗CP所引起的小鼠毒性作用，与模型组相比较，EOP组的体重下降减少，胸腺、脾脏和肝脏指数升高；SOD、GSH升高， MDA降低；血象测定白细胞、红细胞、血小板均有升高，骨髓DNA含量升高，尤以EOP高剂量组作用明显。 三、杜仲多糖对环磷酰胺致肝损伤小鼠的保护作用 应用CP建立肝损伤模型，给予不同剂量EOP后，测定血清ALT、AST、肝组织的SOD和MDA等各项指标。由结果可知，EOP能显著降低CP致肝损伤小鼠血清ALT、AST值、肝组织MDA值，并明显升高肝组织SOD值。 四、杜仲多糖对免疫抑制小鼠的调节作用 应用CP建立免疫低下小鼠模型，给予不同剂量EOP后，测定小鼠体重、胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数等指标。结果显示应用CP后小鼠体重、胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数均降低。EOP能减轻CP致小鼠体重的下降，升高免疫低下小鼠胸腺指数，明显增加小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数和脾脏指数。 五、杜仲多糖对小鼠耐缺氧能力的影响 实验小鼠连续ig不同剂量的EOP7d，末次给药后1h，进行常压耐缺氧实验、急性脑缺血性缺氧实验和小鼠失血性休克实验。以存活时间、全脑停止供血后张口呼吸次数和呼吸维持时间及小鼠心脏搏动时间为指标，观察EOP对小鼠耐缺氧作用的影响。结果显示，EOP可在一定程度上延长存活时间、全脑停止供血后张口呼吸次数，呼吸维持时间及小鼠心脏搏动时间。