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第一部分绪论介绍了免疫分析的原理、种类,以及胶体金的制备、表征和胶体金标记在免疫分析中的应用;综述了共振散射光谱的有关理论、特点、分析应用及发展趋势;介绍了尿微量白蛋白的产生机理、临床意义以及分析进展。第二部分简便快速灵敏测定人尿微量白蛋白的免疫共振散射光谱新方法在pH 4.4的Na2HPO4-C6H8O7缓冲溶液和聚乙二醇(PEG-6000)存在下,尿微量白蛋白(Malb)与羊抗人尿微量白蛋白(Goat anti-Malb)发生特异性反应生成免疫复合物微粒,导致体系在488nm处的共振散射峰增强。据此,建立了一个测定Malb的免疫共振散射光谱法。Malb的浓度在0.03～0.96μg/mL的范围内,与488nm处的共振散射强度增加值ΔI488nm呈线性,呈线性,其回归方程为:ΔI488n=116.0C-2.1,相关系数为0.9991,检测限为0.02μg/mL Malb。该方法用于定量分析正常人尿中微量白蛋白,相对标准偏差在1.3-4.6%之间,同时具有简单、快速的特点,得到的结果较为满意。第三部分快速灵敏检测人尿微量白蛋白的猝灭型金标免疫共振散射光谱探针采用柠檬酸钠还原法制备了粒径约为10.0nm的胶体金颗粒,在pH 6.5条件下用其标记Goat anti-Malb获得了一个简便快速灵敏的尿微量白蛋白(Malb)免疫共振光散射光谱探针。在pH为5.2的C6H8O7-Na2HPO4缓冲溶液中及聚乙二醇(PEG-4000)存在下,金标记anti-Malb发生非特异性聚集并在577nm处有一个最强的共振散射峰。在非特异性聚集金标记anti-Malb中加入Malb,两者发生特异性反应生成免疫复合物并沉降,导致体系在577nm处的共振散射强度急剧降低,Malb的浓度在4-128ng/mL范围内与共振散射降低值ΔI577nm呈线性关系,回归方程为ΔI577nm=703.9CMalb+39.96、相关系数0.9983、检测限为3.2ng/mL,此方法用于检测人尿样中的微量白蛋白,结果满意。第四部分免疫纳米金催化-氧化亚铜增强共振散射光谱检测人尿微量白蛋白在pH 6.5条件下用金纳米颗粒标记Goat anti-Malb获得Malb免疫共振散射光谱探针。本文在pH 5.0 Na2HPO4-C6H8O7缓冲溶液中,Goat anti-Malb发生非特异性聚集,加入Malb后,Goat anti-Malb与Malb发生特异性反应,生成胶体金标免疫复合物分散于溶液中。以16000rpm高速离心分离后,上清液中含有免疫金或胶体金免疫复合物,取适量上清液作为催化晶种,在0.69mg/mL CuSO4,1.0mg/mLNaOH(含13.84mg/mL酒石酸钾钠),0.088mg/mL葡萄糖溶液,70℃条件下反应6min条件下,催化葡萄糖还原CuSO4生成Cu2O沉积在晶种表面,形成大粒径的纳米复合物,在610nm处共振散射信号剧急增大。结果表明,在一定范围内随着Malb浓度的增大,上层清夜中晶种微粒数增多,I610nm值增大。CMalb在0.014-0.43ng/mL范围内与△I610nm存在良好的线性关系,回归方程为:△I610nm=279.72CMalb+10.87,相关系为0.993,检出限为7.2pg/mL。该法用于尿样中微量白蛋白的检测,结果满意,其回收率在92.1-115.7%之间。