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目的:了解湖南地区中南大学湘雅医院、湘雅二医院、湘雅三医院这三所附属医院中CTX-M型ESBLs在革兰阴性杆菌的检出率，确定其基因型，并对其流行病学方面进行研究。
方法:收集2004年10月至2005年7月临床标本分离的254株多重耐药革兰阴性杆菌，按CLSI／NCCLS所推荐的方法进行表型确证试验，采用多重PCR法对ESBLs表型阳性株进行CTX-M酶基因型的检测，用CTX-M组特异性引物对CTX-M基因整个开放阅读框进行扩增并对PCR产物测序，通过blast分析确定其基因分型。对证实携带有CTX-M基因的菌株进一步作RAPD(随机扩增多态DNA)进行菌株DNA的同源性分析。
结果:从254株临床分离的多重耐药革兰阴性杆菌中共检出ESBLs表型阳性菌153株，其中肠杆菌科细菌142株，非发酵菌11株。经多重PCR扩增，142株肠杆菌中109株携带CTX-M基因，11株非发酵菌均未携带CTX-M基因，CTX-M型ESBLs在ESBLs表型阳性的肠杆菌科细菌中检出率达76.8％(109／142)。特异性引物进一步扩增及测序结果显示，携带CTX-M-1组基因有48株，携带CTX-M-9组基因48株，用CTX-M-l组和CTX-M-9组特异性引物扩增均为阴性的13株。共检出三种基因型，即CTX-M-15、CTX-M-3和CTX-M-14。从大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌和弗劳地枸橼酸杆菌中检出CTX-M-3；从斯氏普罗威登菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌中检出CTX-M-14；从大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌中检出CTX-M-15。对50株CTX-M阳性菌株进行RAPD分析，26株大肠埃希菌有12种RAPD类型，14株肺炎克雷伯菌有6种RAPD类型，10株阴沟肠杆菌有7种RAPD类型。结果显示，RAPD类型呈高度多样性。但同时也发现在同一所医院有些菌株表现出相同的RAPD类型，甚至来自不同医院的两株菌表现出相同的RAPD类型。
结论:
1)国际上，本研究首次在斯氏普罗威登菌中检出CTX-M-14。
2)在国内，首次在大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌中检出CTX-M-15。
3)多种细菌携带CTX-M型ESBLs但主要是肠杆菌科细菌。
4)在一定程度上，CTX-M型ESBLs存在克隆传播。
5)产CTX-M型ESBLs的肠杆菌在湖南地区相当普遍，加强对产CTx-M型ESBLs菌株的监测，控制其传播具有重大的意义。