论文部分内容阅读
维生素A和维生素E是婴幼儿配方奶粉营养标签中标示的营养成分,其含量必须经过检测,相关法规对维生素A和维生素E的含量也作了规定,因此建立婴幼儿配方奶粉中维生素A和维生素E含量的检测方法意义重大。本文围绕婴幼儿配方奶粉中维生素A和维生素E的含量测定做了以下研究:1、建立了婴幼儿配方奶粉中维生素A和维生素E的快速前处理方法。方法如下:称5 g样品于150 mL磨口三角瓶中,样品经10 mL温水溶解后加入15 mL 0.1%BHT焦酚乙醇溶液和9 mL 10 mol/L氢氧化钠溶液,摇匀,充入氮气保护,于70℃水浴锅中皂化30 min,冷却后直接加入6 mL 0.5%冰醋酸溶液和25 mL正己烷,置于往复摇床200r/min震摇萃取10 min,用洗瓶往三角瓶中加入milli-Q水约35mL,水洗有机层,静置15 min后吸取上层有机液,过0.45μm滤膜上机进样。2、建立了正相高效液相色谱法测定婴幼儿配方奶粉中维生素A和维生素E的含量。使用硅胶柱(Agilent Zorbax RX-SIL,3μm,4.6×150 mm);柱温35℃,流速为2.0 mL/min,正己烷:四氢呋喃体积比为90:10作为流动相,由紫外检测器检测,在紫外波长325 nm和294 nm下分别测定维生素A和4种维生素E异构体,外标法定量。维生素A的方法检测限(LOD)是0.49μg/100g,维生素A的方法定量限(LOQ)是1.64μg/100g;维生素E的方法检测限(LOD)在19.8~23.6μg/100g之间,维生素E的方法定量限(LOQ)在65.9~78.7μg/100g之间。维生素A和维生素E在曲线浓度范围内线性良好,相关系数大于0.99。维生素A的加标回收率在93.5%~103.5%之间,相对标准偏差在0.41%~2.13%之间;维生素E的加标回收率在92.0%~98.9%之间,相对标准偏差在0.40%~2.98%之间。3、研究了维生素A和维生素E曲线配制和放置期间内的稳定性,维生素A配制改进如下:称取25.0 mg维生素A标准品,用0.1%BHT乙醇溶液溶解后,转移入100 mL容量瓶中,定容至刻度,此溶液浓度约为0.5 mg/mL。将维生素A标准溶液转移至棕色试剂瓶中,封口膜密封后,在-20℃下避光保存,有效期1个月。临用前将溶液回温至20℃,并进行浓度校正。维生素A标准溶液在加入BHT保护后比较稳定,而且BHT在紫外分光光度计325 nm下几乎没有吸收,不会对维生素A的浓度校正造成偏差。而考察4种维生素E异构体的标准储备液,发现4种维生素E异构体比较稳定,不需要加入BHT保护,研究了用BHT保护后的维生素A和维生素E标准工作溶液在-20℃下避光保存15天,发现15天内各个浓度点的响应值变化不大,可以用以准确定量。4、分析了奶粉中维生素A和维生素E测量不确定度的来源:(1)测量重复性实验导致的不确定度;(2)标准物质引入的不确定度:标准储备液的不确定度和稀释所引入的不确定度;(3)试样制样过程的不确定度:包括天平、回收率的不确定度;(4)校正仪器引入的不确定度。最终计算出本法维生素A的不确定度是7.9%,维生素E的不确定度是7.7%。