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目的体外培养小鼠海马神经干细胞(NSCs),明确干扰Olig2对MK-801处理后海马NSCs增殖、分化及凋亡的影响,探究Olig2对MK-801干预后海马神经发生的调控作用。方法选取24h以内的新生C57BL/6小鼠,分离提取海马组织用来原代培养NSCs,采用免疫荧光染色进行细胞鉴定和纯度鉴定。用200μM的MK-801处理NSCs 24h以建立细胞损伤模型,并在此基础上进行Olig2-shRNA慢病毒感染,将NSCs分为4组:(1)MK-801+慢病毒干扰组[MK801+Olig2-shRNA组简称(M+O组)],(2)MK-801+慢病毒空载体组[MK-801+LV-EGFP简称(M+L组)],(3)MK-801组(简称M组),(4)空白对照组(简称Blank组)。采用Western blot检测Olig2的表达,以确定Olig2-shRNA慢病毒载体是否构建成功。采用Western blot、Real-time PCR、免疫细胞化学技术检测Nestin、Sox2、Ki67、S100β和NeuN的表达,以观察NSCs的增殖和分化情况,用流式细胞术检测NSCs凋亡情况。结果Western blot结果显示,Olig2-shRNA1组可明显降低Olig2的表达(P<0.05);与M组相比较,M+O组中Olig2表达明显降低(P<0.05),NeuN、Sox2显著升高(P<0.05),M+L组和Blank组中Olig2、NeuN、Sox2的表达均无统计学差异(P>0.05)。qRT-PCR结果显示,与M组相比较,M+O组中Nestin和Ki67表达显著升高(P<0.05),Blank组Nestin表达量显著升高(P<0.05),M+L组与M组相比Nestin表达量无统计学差异(P>0.05),M+L组和Blank组分别与M组相比,Ki67的表达均无统计学差异(P>0.05),M+O组、M+L组和Blank组S100β均无统计学差异;免疫荧光结果显示,与M组相比,M+O组Ki67表达显著升高(P<0.05),M+L组和Blank组Ki67表达无统计学差异(P>0.05),M+O组、M+L组和Blank组S100β均无统计学差异;流式细胞技术结果显示,M+O组早期凋亡和总凋亡率较M组的凋亡率均降低且有统计学差异(P<0.05),晚期凋亡对比无明显差异;M组较Blank组早期凋亡和总凋亡率升高且有统计学差异(P<0.05)。结论1.经MK-801处理NSCs后其增殖能力下降,凋亡增加。2.低表达Olig2可促进精神分裂症后NSCs的增殖、促进NSCs向神经元分化,减少细胞凋亡,增加海马神经发生。