布朗卷柏Selaginella braunii Baker为卷柏科植物布朗卷柏的干燥全草,分布于长江以南地区,全草在民间药用,有清热解毒、清肺止咳、止血的作用。迄今仅见一篇有关其化学成分的研究报道,未见其系统的生药学鉴定、活性成分的含量测定、HPLC指纹图谱及药理作用的相关研究报道。布朗卷柏在性状上与来源于同属的多种植物药极其相似,在实际应用中易于混淆。笔者对在湖北省西部地区采集的布朗卷柏和来源于同属的6种植物药(江南卷柏、深绿卷柏、翠云草、薄叶卷柏、疏叶卷柏、中华卷柏)进行了性状、显微特征、TLC和HPLC指纹图谱的比较研究,建立了布朗卷柏专属性的鉴定方法和活性物质总黄酮及穗花杉双黄酮的含量测定方法。根据布朗卷柏药材性状特点(主茎所占比例较大),将其药材样品主茎及枝叶分离,测定了不同批次布朗卷柏全草、主茎及枝叶的总黄酮及穗花杉双黄酮的含量;对布朗卷柏全草、主茎及枝叶不同提取部位对人肝癌细胞HepG2的抑制活性进行了检测,并与同属植物药薄叶卷柏、翠云草和石上柏进行比较。生药学鉴定结果表明,布朗卷柏与同属6种植物药相比,其性状特征主要表现在,干燥全草中上部呈卷缩状;根托极短,先端多分叉;主茎近四棱柱形,中下部无分枝。茎横切面显微特征表现在,老茎木质部略呈“山”字形,但“山”字两端的突出有时不明显,嫩茎木质部略呈“一”字形;薄层色谱中,布朗卷柏色谱图显示了分离较好的6个斑点,在相同实验条件下有两个特征主斑点。上述特征能够将布朗卷柏与同属植物药进行有效的区分,保证用药的准确性。利用实验建立的布朗卷柏总黄酮含量测定方法,分别对不同批次的布朗卷柏全草、主茎及枝叶的总黄酮含量进行测定。结果显示除个别样品外,布朗卷柏全草的总黄酮含量均在2.0%以上;比较2018年7月和10月相同地点采集的药材样品的总黄酮含量测定结果可知,在此生长期间总黄酮含量变化幅度不大,认为其采收期定在7月~10月均可。不同批次布朗卷柏枝叶的总黄酮含量均较主茎高,高出比例范围为3.81%~53.03%,初步认为以枝叶入药更为合理。研究建立了布朗卷柏的HPLC指纹图谱,确认了14个共有峰。在相同实验条件下比较布朗卷柏及同属6种植物药所得谱图,结果显示不同种间的出峰数目、出峰时间、共有峰数目均不同,能够有效将本种与同属植物药相区分。指认了图谱中的1、5、6号峰分别为穗花杉双黄酮、罗波斯塔-4?-甲醚和扁柏双黄酮的谱峰,并测定了布朗卷柏全草、主茎、枝叶的穗花杉双黄酮的含量。全草的穗花杉双黄酮含量随采收地点和采收期的不同变化范围较大,10月采收的药材样品中含量较7月的显著增高;枝叶的含量较主茎平均高出74.8%。进一步验证了以枝叶入药品质为好。根据卷柏属药用植物抗肿瘤活性的相关研究报道,选取人肝癌HepG2细胞作为研究对象,利用MTT法测定其抗肿瘤活性。结果显示布朗卷柏乙酸乙酯部位和甲醇部位具有较好的抗肿瘤活性,其中乙酸乙酯部位活性最强,且抑制活性呈时间和剂量依赖性;枝叶的三种提取部位活性均较主茎强,进一步证明了枝叶的品质特点。利用倒置显微镜、Hoechst33258荧光显微镜及流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染观察检测布朗卷柏全草活性最好的乙酸乙酯提取部位不同剂量下对人肝癌HepG2肿瘤细胞的影响,结果显示随着给药剂量的增加,肿瘤细胞形态发生明显的变化,且凋亡率随给药剂量的增加而增加,进一步证实了布朗卷柏对人肝癌HepG2细胞有很好的抑制作用。本研究建立了布朗卷柏专属性的鉴定方法、质量控制方法,并验证其有一定的抗肿瘤活性。对于布朗卷柏的鉴定、质量评价和开发应用提供了重要的相关实验依据。