pH敏感性白芨多糖聚合物胶束体外性质及体内抗肿瘤作用研究

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近年来,随着各种功能性高分子材料的不断涌现,新型给药系统已经成为药剂学科的发展方向。环境敏感型聚合物是能够感知外界环境的物理或化学刺激(如温度、p H、离子强度等)的一类新型功能性高分子材料,也称为智能型聚合物。本研究在课题组前期制备了SA-BSP聚合物的基础上,进一步探讨提高胶束载药量和包封率的方法,并对其是否具有pH敏感性进行考察,并对其体内外抗癌活性进行评价。首先参考课题组前期工作合成了共聚物材料,将荧光物质FITC接枝于SA-BSP,以便于考察胶束胞内摄取情况。通过氢核磁光谱法进行了确认。结果表明,FITC已接枝于SA-BSP。改用混合溶剂溶解多西他赛,制备载多西他赛胶束。结果表明,采用氯仿:乙醇=3:1(v/v)溶解DTX时,使其载药量增加。测定了不同pH下的胶束粒径、zeta电位以及体外释放。高效液相色谱法(HPLC)测定体外不同pH介质条件下DTX和DTX-SA-BSP胶束释放情况。选取MCF7和A549细胞,研究了DTX和DTX-SA-BSP胶束体外抗癌活性。用流式细胞仪检测细胞摄取和凋亡率。结果表明,pH值对DTX-SA-BSP聚合物胶束的释放影响效果明显,48 h后,DTX-SA-BSP胶束在pH5.0、6.0和7.4的DTX释放百分数分别为(79.25±1.80)%、(71.64±0.80)%和(68.58±1.70)%,在pH 5.0的介质中,DTX-SA-BSP聚合物胶束的释放最快。0.5μg/mL的DTX-SA-BSP聚合物胶束作用MCF7和A549细胞的存活率为(39.2±1.1)%和(46.6±5.4%)%,而DTX溶液细胞存活率为(50.23±2.85)%和(53.4±5.4)%。DTX-SA-BSP共聚物胶束体外细胞毒性高于DTX溶液。DTX-SA-BSP共聚物胶束和DTX溶液诱导细胞凋亡百分数分别为73.4%和69.64%。激光共聚焦、流式细胞术和高效液相色谱(HPLC)测定结果可知,DTX-SA-BSP共聚物胶束细胞摄取强于DTX溶液。DTX-SA-BSP共聚物胶束和DTX溶液对BALB/c 4T1鼠肿瘤生长抑制率分别为59.05%和44.29%。体内抗肿瘤实验结果进一步证实DTX-SA-BSP共聚物胶束有更好的抗癌效果。SA-BSP聚合物胶束有望成为更好的疏水药物载体。
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