斑马鱼Clock1a蛋白通过polo-like-kinase 1调控其生殖周期

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哺乳动物的CLOCK基因对生物节律的调控和生殖功能方面起着非常重要的作用。然而,Clock在斑马鱼生物钟及生殖中的作用尚未被探索。在本文中我们发现clock1a敲除的斑马鱼性成熟较野生型斑马鱼晚,并且产卵量也远小于野生型。在实验室条件下,野生型斑马鱼通常以7天周期产卵;而clock1a突变体则不能以7天为周期产卵。当我们延缓这个7天的周期到10天时,我们发现突变体的产卵量有所增高,而且与野生型的产卵量相近。通过石蜡切片和H&E染色观察卵巢形态,我们也发现了在斑马鱼交配后,clock1a突变体卵巢中不成熟的卵细胞很多,直到10天后其成熟卵细胞才大量出现。为了寻找生物钟的调控机制,我们在先前我们进行的转录组分析结果中发现在细胞分裂中起作用的激酶plk1在clock1a突变体中是下调的。我们假设生物钟通过减数分裂的过程某一环节在生殖中起到关键性的作用。我们发现plk1是由生物钟通过E’-box介导调控。Rec8蛋白也是减数分裂中的关键性蛋白,它决定着减数分裂过程的结束并且可被Plk1磷酸化并降解。Clock1a的缺失导致plk1下调,进而造成Rec8不能降解而使得减数分裂不能正常进行。其次,往野生型雌性斑马鱼腹腔注射Plk1的抑制剂BI2536也能导致卵巢中Rec8的积累和产卵量的下调。综上所述,这些结果表明了,在斑马鱼中Clock1a对生殖功能方面起着非常重要的作用,Clock1a是通过调控plk1介导的对减数分裂关键性蛋白Rec8磷酸化降解作用来延缓其产卵周期的。
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