小鼠成熟的卵母细胞会停滞在第二次减数分裂中期,直到有精子刺激或给予物理或化学刺激时,小鼠卵母细胞才能解除停滞,恢复减数分裂。减数分裂的恢复被称为“激活”,其特征是形成极体以及雄性和雌性原核,无论是受精还是孤雌激活,都伴随着卵母细胞内的Ca²⁺波动。酒精激活卵母细胞孤雌激活是常用的激活方法之一,但是现有激活体系尚缺乏稳定性。本实验通过在卵母细胞老化过程中和酒精刺激后的培养过程中添加细胞外钙离子,研究细胞外钙离子对酒精刺激小鼠卵母细胞激活率的作用,并结合L-型钙离子通路和钙感知受体的抑制观察细胞外钙离子对酒精刺激小鼠卵母细胞孤雌激活的影响,深入探究酒精刺激小鼠卵母细胞的机制,寻找能够提高小鼠的孤雌激活率的方法,为其他动物繁殖生物技术,如动物克隆、体细胞核移植、动物转基因工程,胚胎干细胞等提供技术支持。结果表明:（1）体内老化6h的小鼠卵母细胞,酒精激活组卵母细胞的激活率显著地高于未经酒精激活组（79.7%VS 6.8%,P<0.05）。（2）小鼠卵母细胞在老化过程中添加细胞外钙,酒精刺激后激活率显著升高（72.5%VS14.2%,P<0.05）;酒精刺激后的培养过程中添加细胞外钙,酒精刺激后卵母细胞的激活率显著升高（48.1%VS 14.2%,P<0.05）。（3）体外老化过程中添加2μM NPS-2143（钙感知受体抑制剂）可以使酒精刺激小鼠卵母细胞的激活率显著降低（55.4%VS 82.3%,P<0.05）。酒精刺激后的培养过程中添加2μM NPS-2143可以使酒精刺激小鼠卵母细胞的激活率显著降低（39.0%VS47.5%,P<0.05）。（4）体外老化过程中添加400μM Nifedipine（L-型钙离子通道抑制剂）可以使酒精刺激小鼠卵母细胞的激活率显著降低（11.8%VS 82.3%,P<0.05）。酒精刺激后的培养过程中添加400μM Nifedipine可以使酒精刺激小鼠卵母细胞的激活率显著降低（30.9%VS47.5%,P<0.05）。（5）体外老化过程中添加400μM Nifedipine和2μM NPS-2143可以使酒精刺激小鼠卵母细胞的激活率显著降低（4%VS 82.3%,P<0.05）。酒精刺激后的培养过程中添加400μM Nifedipine和2μM NPS-2143可以使酒精刺激小鼠卵母细胞的激活率显著降低（18.9%VS 47.5%,P<0.05）。本实验通过研究细胞外钙在酒精刺激小鼠卵母细胞激活中的作用,发现细胞外钙在体外老化和酒精刺激后的培养过程中都起着重要作用,钙感知受体和L-型钙离子通路对酒精刺激小鼠卵母细胞激活有重要作用。在体外老化和酒精刺激后的培养过程中添加细胞外钙,可以显著提高小鼠卵母细胞的激活率。