论文部分内容阅读
目的：通过建立的兔耳瘢痕模型的动物模型,观察青蒿琥酯、珍珠水解液及两者复合的自制外用膏剂对瘢痕组织胶原纤维、新生毛细血管、血管内皮生长因子和上皮基质交感分子1表达等的影响,探讨青蒿琥酯联合珍珠水解液抗病理性瘢痕的作用机制,为进一步研制有效的外用中药抗瘢痕膏剂提供实验依据。方法：(1)选取新西兰大耳白兔12只,随机分为空白对照组、单纯基质对照组、青蒿琥酯组、珍珠水解液组、青蒿琥酯与珍珠水解液复合组即青珠复合组和阳性药硅酮凝胶(疤复新)组共6组。在每只兔耳腹侧面制作6个直径为1cm的圆形皮肤全层及软骨膜缺损创面,每组2只兔,24个创面,建立增生性瘢痕模型。并配制含各种药物成分的外用膏剂,于创面上皮化时(即创口制备术后28天)开始在瘢痕部位涂抹组别的对应膏剂治疗,并轻揉直至药物吸收,3次／天,连续用药28天；空白对照组不做处理。术后56天将动物处死,切除兔两耳增生性瘢痕,多聚甲醛固定,包埋,切片,后行HE染色及VG染色。光镜观察瘢痕区形态学改变,检测瘢痕组织的增生指数(HI)、成纤维细胞数密度(NA)及胶原纤维面积密度(AA)。(2)采用免疫组织化学法测瘢痕组织的CD34来检测各组瘢痕的微血管计数(MVC);并用免疫组织化学法和Western-Blot法检测比较不同组别的兔耳瘢痕组织中血管内皮生长因子(VEGF)和上皮基质交感分子1(EPSTI1)的蛋白表达情况。结果：(1)12只兔、144个创面进入结果分析：①大体观察：青蒿琥酯组、青珠复合组瘢痕略高出兔耳皮肤表面,触之质软,色泽较白,接近兔耳正常肤色；珍珠水解液组瘢痕较青蒿琥酯组更凸出皮缘,质地韧；对照组瘢痕则明显高出于兔耳皮肤表面,色红,质地硬；阳性药硅酮凝胶组瘢痕不凸出皮肤表面,表面平滑柔软。②光镜下观察：青蒿琥酯组、青珠复合组和硅酮凝胶组的成纤维细胞胞体变小,.胶原纤维较稀疏,排列有序,微血管较少。③青蒿琥酯组、青珠复合组和硅酮凝胶组的增生指数HI、成纤维细胞数密度NA和胶原纤维面积密度AA均明显低于于对照组,且青珠复合组的数值明显低于青蒿琥酯组,差异有统计学意义(P＜0.01)。(2)免疫组织化学法和Western-Blot法检测发现,与对照组比较青蒿琥酯组、青珠复合组和硅酮凝胶组兔耳瘢痕组织中微血管计数、VEGF. EPSTI1蛋白的表达水平明显低于对照组,且青珠复合组的表达水平明显低于青蒿琥酯组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论：(1)青蒿琥酯膏剂和青蒿琥酯与珍珠水解液的复合膏剂均可以抑制动物实验性瘢痕的增生；而将青蒿琥酯与珍珠水解液复合的膏剂抗瘢痕作用优于青蒿琥酯单剂。(2)微血管的形成及血管内皮生长因子的过度表达可能是促进瘢痕形成的重要因素。(3)上皮间质交感分子的过度表达可能是促进瘢痕形成的重要因素。