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背景:五环三萜类化合物存在于香料、水果、种子、蔬菜和草药等植物中,具有广泛的生物活性,如抗急、慢性炎症,抑制肿瘤细胞增生,诱导凋亡,抗血管生成和抗肿瘤侵袭等。PLGA由单体乳酸和羟基乙酸随机聚合而成,有良好的生物相容性、无毒、良好的成囊和成膜的性能。此外,PLGA是一种可降解的功能高分子有机化合物,PLGA共聚物通过水解乳酸和羟基乙酸间的酯键而降解,这些单体容易通过体内三羧酸循环分解为二氧化碳和水而代谢掉。PLGA已通过美国FDA认证,被正式作为药用辅料收录进美国药典,广泛应用于制药、医用工程材料和现代化工业领域。随着纳米技术的不断发展,PLGA可制备成各种类型的聚合物,如微球、微胶囊、纳米颗粒等,携带疫苗、多肽、蛋白质和小分子药物,应用于纳米药物传输系统中。目的:筛选新合成的五环三萜类化合物的抗肿瘤活性;分析抗肿瘤活性最高的WZW-50诱导不同肿瘤细胞凋亡和阻遏细胞周期的的分子机制;优化载药PLGA纳米粒的制备方法,获得高包封率的载药纳米粒;对纳米粒的形态特征进行表征,并检测其对肿瘤细胞生长抑制情况。方法:1.MTT法筛选具有抗肿瘤活性的新型五环三萜类化合物。2.流式细胞仪检测细胞凋亡率。3.Western blotting检测细胞周期、凋亡相关通路蛋白。4.利用纳米沉淀法制备载药WZW-50 PLGA纳米粒;利用马尔文粒度测定仪检测纳米粒粒径及Zeta电位。5.利用TEM检测PLGA纳米粒子的形态。6.利用HPLC法绘制WZW-50的标准曲线并计算载药WZW-50 PLGA纳米粒的包封率。7.荧光显微镜检测载有香豆素-6的PLGA纳米粒的细胞摄取情况。结果:1.新型五环三萜类化合物对不同肿瘤细胞存活率有一定影响,其中WZW-50的活性最高。WZW-50对Hela细胞的抑制作用呈浓度、时间依赖性。2.流式细胞术检测细胞凋亡结果显示:WZW-50可诱导MCF-7和Hela细胞凋亡。10μM药物诱导MCF-7和Hela的凋亡率分别为19.88%和14.01%。3.由Western blotting结果可推断WZW-50可能通过线粒体凋亡通路引起细胞凋亡;WZW-50阻遏细胞周期G1/S的进程。4.成功制备了PLGA载药纳米粒,PLGA纳米粒粒径为106±1.27 nm,Zeta电位-14.7±0.76 m V。5.TEM显示载药WZW-50 PLGA纳米粒为形态均一的圆形粒子。6.HPLC法测得载药WZW-50 PLGA纳米粒的包封率为72.12±5.68%。7.荧光显微镜检测结果表明:载有香豆素-6的PLGA纳米粒能够高效导入Hela和MCF-7细胞中。8.载药PLGA纳米粒对Hela和MCF-7细胞具有明显的抑制效果。结论:五环三萜类衍生物WZW-50能有效地抑制不同肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡。Western blotting结果表明:WZW-50可能通过线粒体凋亡通路引起细胞凋亡;WZW-50能阻遏细胞周期G1/S的进程;平均粒径为106±1.27 nm的PLGA载药纳米粒可以有效导入肿瘤细胞,抑制肿瘤细胞生长。