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目的 探讨HPV-16 E6和E7基因的DNA和RNA含量与宫颈癌发生发展的关系,以及实时PCR和RT-PCR检测HPV-16 E6和E7基因的临床应用价值。 方法 将HPV-16 E6和E7基因的PCR产物进行T-A克隆,置备含E6和E7基因的质粒,以此作为标准品建立标准曲线实时PCR方法,分别对3种宫颈癌细胞株、98例TCT标本(包括16例正常对照、22例ASCUS、30例LSIL、30例HSIL)和55例新鲜宫颈组织标本(包括16例正常对照、39例浸润性宫颈鳞癌)进行HPV-16 E6和E7基因的DNA和RNA拷贝数的定量检测,并与普通PCR和RT-PCR结果进行比较。所有数据均应用SPSS 8-0软件进行统计处理。 结果 1.建立的标准曲线相关系数大于0.99,PCR效率在90%以上。 2.HPV-16 E6和E7基因的DNA和RNA拷贝数在宫颈癌细胞株CaSki、SiHa和HeLa中从高到低依次是CaSki>SiHa>HeLa,SiHa细胞E6基因DNA和RNA拷贝数分别为9.42×10~3copy/ng DNA和2.01×10~4 copy/ng RNA,E7基因DNA和RNA拷贝数分别为1.49×10~1 copy/ng DNA和4.43×10~1 copy/ng RNA,CaSki细胞E6、E7的DNA拷贝数分别是SiHa细胞的